实验三实验动物基本操作技术.docVIP

实验三 实验动物大多数理实验是以动物为实验对象的常用实验动物青蛙与蟾蜍小白鼠大白鼠豚鼠家兔猫狗实验特点，掌握常用的动物实验基本操作技术，有利于能力的培养。青蛙与蟾蜍小白鼠大白鼠豚鼠家兔实验基本操作技术一实验动物的编号为了分组和辨别的方便，实验时常需实验动物进行编号。常用的编号方法如下： （1）常用染料：红色染料：5％中性红或品红液；黄色染料：3％～5％苦味酸溶液；咖啡色染料：2％硝酸银溶液；黑色染料：煤焦油的酒精溶液。（2）标记规则：根据实验动物被毛颜色的不同选择不同化学药品涂染动物。A.家兔等动物的标记方法：用毛笔蘸取不同颜色的染料溶液直接在动物背部涂写号码。若用硝酸银溶液涂写，则需在日光下暴露1min。B.大鼠、小鼠的标记：通常在动物不同部位涂上有色斑点来表示不同的号码。 如编号将小白鼠背部分前肢、腰部、后肢的左、中、右部九个区域，从右到左标记用专门的打孔器在动物耳朵的不同部位打孔表示此法常用于狗、猴、猫等大动物的编号。将号码牌固定于动物的颈圈或耳上。先将动物被毛去除，用针在动物皮肤上刺出号码，再用酒精墨汁涂染即可。二实验动物的捉拿与固定方法 用左手握住动物，以食指按压其头部前端，拇指按压背部。捉拿法有二种一种是用右手提起尾部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后上方轻拉，此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙面，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并用小指和手掌尺侧夹持其尾根部固定手中；另一种抓法是只用左手，先用拇指和食指抓住小鼠尾部，再用手掌尺侧及小指夹住尾根，然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。捉拿时，右手抓住鼠尾基部（因抓尾尖动物会扭动易使其尾部的皮肤脱落，影响实验的进行）将大鼠放在粗糙面上，左手戴上防护手套或用厚布盖住大鼠，抓住其整个身体并固定其头部以防咬伤。捉拿时勿用力过猛，勿捏其颈部，以免引起窒息捉拿时以拇指和中指从豚鼠背部绕到腋下抓住豚鼠，另一只手托住其臀部。体重小者可用一只手捉拿，体重大者捉拿时宜用双手捉拿时一手抓住其颈背部皮肤。轻轻将兔提起，另一手托住其臀部根据实验需要。如作兔耳血管注射时，可用兔盒固定；如要做腹部注射、手术及测血压等实验时需将家兔固定在兔手术台上。（1）头部的固定用特制的兔头夹。兔头夹为附有铁柄的半圆形铁圈和一可调铁圈。一般动物取仰卧位固定时，先将麻醉好的兔颈部放在半圆形的铁圈上，再把其嘴伸入可调铁圈内，最后将兔头夹的铁柄固定在实验台上。或用一根粗棉绳，一端拴住动物的两个上门齿，另一端拴在实验台的铁柱上。做颈部手术时，可将一粗注射器筒垫于动物的项下，以抬高颈部，便于操作。若动物取俯卧位固定，特别是在头颅部实验中，常用马蹄形头固定器固定。（2）四肢的固定一般在头部固定后，再固定四肢。先用粗棉绳的一端缚扎于踝关节的上方。若动物取仰卧位，可将两后肢左右分开，将棉绳的另一端分别缚在手术台两侧的木钩上，而前肢须平直放在躯干两侧。再将绑缚左右前肢的两根棉绳从背后交叉穿过，压住对侧前肢小腿，分别缚在手术台两侧的木钩上。固定的姿势依手术或实验种类而定。如进行颈、胸、腹、股等部的实验，多采取仰卧位，脑和脊髓实验则常选用俯卧位。实验动物的给药方法  （1）小鼠灌胃法将小鼠放在粗糙面上，左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手掌上，使小鼠腹部朝上，注意使口腔和食管成一直线。右手持灌胃针管（1～2ml注射器上连接1216号注射针头，尖端部磨钝，针头长45cm，直径约为1mm）从小鼠口角插入口腔内，然后用灌胃管轻压小鼠头部，经舌面紧贴上腭进入食管，进针23cm后，此时动物安静并无呼吸异常，即可将药注入。如遇阻力或动物憋气时则应抽出重插，不能强插以免刺破食管或误入气管使动物死亡。药液注完后轻轻退出灌胃管。操作时应动作轻柔，细致以防损伤食道及膈肌。灌药量一般为0.10.3ml/10g体重。兔灌胃法用兔固定箱，可一人操作。右手将开口器固定于兔口中，舌压在开口器下面，左手将导尿管经开口器中央小孔插入。如无兔固定箱，则需两人协作进行，一人就坐，腿上垫好围裙，将兔的躯体夹于两腿间，左手紧握双耳，固定其前身，右手抓住其两前肢。另一人将开口器横放于兔上下颌之间，固定在舌面上,将导尿管自开口器中央的小孔插入，慢慢沿兔口腔上腭壁插入食道约15～18cm。插管完毕将胃管的外口端放入水杯中，切忌伸入水过深。如有气泡从胃管逸出，说明不在食道内而是在气管内，应拔出来重插。如无气泡逸出，则可将药推入，并以少量清水冲洗导尿管保证管内药液全部进入胃内。最后拔导尿管。皮下注射小鼠通常在背部皮下注射。注射时以左手拇指和中指将小鼠颈背部皮肤轻轻提起，食指轻按其皮肤，使其形成一个三角形小窝，右手持注射器从三角窝下部刺入皮下，轻轻摆动针头，如易摆动时则表明针尖在皮下，此时可将药液注入，针头拔出后，以左手在针刺部位轻轻捏住皮肤片刻，以