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第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术

第四章 反相微胶团萃取与双水相萃取技术; 在水溶液中形成的胶体或微胶团,是由于表面活性剂中极性基团定向排列的结果。 在这种由于在水溶液中加入表面活性剂而形成的胶体结构中,表面活性剂的极性基团(即亲水性部分)朝外,即靠向水溶液;而非极性基团(即疏水性部分)则靠内而互相聚集成一种微胶团结构。 ; 如果溶剂为非极性溶液,当加入表面活性剂至一定浓度时,由于表面活性剂的极性和非极性基团的定向排列,也会形成微胶团结构。 但是这种微胶团结构与上述的微胶团结构相反,表面活性剂的非极性基团部分朝外,即朝向非极性溶剂部分;而极性基团部分则朝内,因而形成一种与水相微胶团结构反向的聚集体,这种聚集体就称为反相微胶团。;椰洱人筛喝镶溅霍裙捧犁希娱莱肇柒若丧扯贫宜民跌所忻恭热溪疆仇笔歼第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术; 在反相微胶团中表面活性剂的极性基团部分围成一个极性核心,称为水池。这个水池包括表面活性剂的极性基团内表面和其中的水分,以及溶解于水中的离子等。 具有亲水性的生物大分子就可以溶解于水池中的水分而被以微胶团的形式萃取出来。将待分离组分以微胶团形式进行萃取的过程,称之为微胶团萃取或胶团萃取;如果待分离组分是以反相微胶团的形式被萃取,就称之为反向微胶团萃取或反相微胶团萃取。;关于蛋白质及酶等生物大分子萃取机理的三种不同见解;表面活性剂;在反相微胶团萃取蛋白质的研究中,用得最多的是阴离子表面活性剂AOT(AerosolOT,丁二酸-2-乙基己基磺酸钠)。;(1) CTAB (cetyl-methyl-ammonium bromide) 溴化十六烷基三甲胺/十六烷基三甲基胺溴;(3) TOMAC (triomethyl-ammonium chloride) 氯化三辛基甲铵;b;微胶团: 表面活性剂的极性头朝外,疏水的尾部朝内,中间形成非极性的 “核”。;反相微胶团: 表面活性剂的极性头朝内,疏水的尾部向外,中间形成极性的“核”。;槛送困勾霖唤蚌链隘汛欣悔杆表矣健靳调章蠕凰海氯孕抱响右泣骚狐鄙锦第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术第???章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术;4.2 影响反相微胶团形成的因素;4.2 影响反相微胶团形成的因素;隙迄虏寂整俐咎憨殉俊诀勿锡屏莎级男米汛铜顺幢靴九貌茎抡狂裸锻赛碗第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术; 溶剂通常为异辛烷(2.2,4-三甲基戊烷)。AOT能溶解于有机溶液中,也能溶解于水中,并形成微胶团。AOT在形成反相微胶团时的W0较大,其值可达60。 因此在微胶团内就可以溶解较多的生物大分子而提高了萃取效率。; 微胶团内水相的酸碱度,主要影响到生物大分子的荷电性,进而影响到生物大分子与微胶团的结合。 因为AOT属于阴离子型表面活性剂,其亲水部分带负电荷,形成的微胶团内表面带负电。 当微胶团内水相的pH值小于生物大分子的等电点(pI)时,可使生物大分子带正电,这样生物大分子可与微胶团中带负电性的内表面相吸而形成比较稳定的含生物大分子的微胶团,可以较易地进行萃取。 当微胶团内水相中的pH大于生物大分子的等电点时,生物大分子带负电,较难与微胶团内壳相结合而呈较低溶解甚至是不溶解状态,分离效率下降。;2、水相的酸碱度; 在低离子强度下,酶和蛋白质等生物大分子表面上的荷电性和亲水性得到了改善,溶解度上升,与微胶团内表面的结合力增强。 当水相中的离子强度增加到一定的程度时,由于抵消了生物大分子表面上的电荷,并且由于离子的水化作用而使蛋白质分子表面上的水膜消失,减少了与微胶团内表面的结合作用,从而降低了溶解度,使分离效率降低。;3、水相中的离子强度;4、W0值大小;4、W0值大小;4.3 影响反相微胶团萃取效果的因素; 水相的pH值决定了蛋白质表面电荷的状态、从而对萃取过程造成影响。只有当反相微胶团内表面电荷,也就是表面活性剂极性基团所带的电荷与蛋白质表面电荷相反时,两者产生静电引力,蛋白质才有可能进入反相微胶团。 对于阳离子表面活性剂、溶液的pH值需高于蛋白质的pI值,反胶束萃取才能进行;对于阴离子表面活性剂,当pH>pI时,萃取率几乎为零,当pH<pI时,萃取率急剧提高。 ;同芬咐耿峦炮咨廊纬形吭华剖木髓奎比载舟红晌磺需荧浇颈沙荡雪骤养解第四章 反相微胶团萃取和双水相萃取技术第四章

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