草鱼noxa基因克隆及其应答gcrv入侵的表达响应 - 水生生物学报.pdf

第 4 0 卷 第 1 期 水 生 生 物 学 报 Vol. 4 0, N o. 1 2 0 1 6 年 1 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA J a n., 2 0 1 6 doi: 10.7541/2016.8 草鱼Noxa基因克隆及其应答GCRV入侵的表达响应 1, 2 1 1 1 1 卢肖男 黄 容 廖兰杰 朱作言 汪亚平 (1. 中国科学院水生生物研究所, 武汉 430072; 2. 中国科学院大学, 北京 100049) 摘要: 研究通过获得草鱼Noxa基因(Cinoxa)全长cDNA, 进行序列分析和进化树构建, 使用定量PCR (qPCR) 的 方法研究其在GCRV刺激下的表达模式。研究发现, 草鱼Noxa基因的蛋白序列与斑马鱼Noxa基因具有高度相 似性。通过分析草鱼和斑马鱼的Noxa基因的蛋白三维结构(3D)模型, 研究发现两者具有高度一致的蛋白三维 结构模式, 该模型与高等哺乳类中的Bcl-2家族蛋白中C端结构域同源。对Cinoxa在GCRV刺激下的表达模式 的研究表明, Cinoxa在GCRV感染后中肾、脾脏和头肾中表达发生显著性变化, 攻毒后24h和120h出现显著上 调表达。研究表明草鱼Noxa 为斑马鱼Noxa 的同源基因, 并且参与了草鱼对GCRV入侵的应答反应, 为深入研 究鱼类Noxa应答病毒入侵的功能和转录调控机制奠定了基础。 关键词: 草鱼; Cinoxa; GCRV刺激; 基因表达; 应答反应 中图分类号: S942.9 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2016)01-0058-05 [2] 先天性免疫是抵御病毒入侵的第一道防线, 由 泡的方式分解不会引发机体炎症反应 。通常细胞 于鱼类的获得性免疫系统远不如高等脊椎动物完 凋亡的主要途径分为外源性途径和内源性途径。 善, 因此, 先天性免疫对于鱼类抵抗病毒入侵起到 外源性途径通常又称为死亡受体途径, 这种途径主 至关重要的作用。一旦病毒入侵细胞, 病毒的各个 要是通过细胞外配体与细胞质膜上的死亡配体结 组成部分会通过不同的信号传导途径激活一系列 合后募集相应接头蛋白形成死亡诱导信号复合体 的细胞免疫反应, 如干扰素(Interferon, IFN)途径和 (Death inducing signaling complex, DISC), 随后 炎症反应途径等。当IFN途径激活后细胞内会产生 DISC激活起始因子Caspase-8, Caspase-8活化后依 并分泌Ⅰ型IFN, 分泌的Ⅰ型IFN会通过自分泌和旁