酿酒酵母TRK1和TRK2钾吸收缺陷型菌株的构建.PDFVIP

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酿酒酵母TRK1和TRK2钾吸收缺陷型菌株的构建

微生物学通报 FEB2) 183~187 Microbiology ©2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 酿酒酵母TRK1 和TRK2 钾吸收缺陷型 菌株的构建 1* 1 2 2 3 郭兆奎 杨 谦 颜培强 万秀清 姚泉洪 (1. 150001) (2. 157011) (3. 201106) 摘 要: 为更好的进行钾素营养有关基因表达调控和功能性研究, 我们采用同源重组法通过重叠 引物扩增分别将URA3 和HIS3 基因替代酿酒酵母的 TRK1 和 TRK2 基因, 并以酿酒酵母的尿嘧啶 合成酶 URA3 基因和组氨酸合成酶HIS3 为标记基因, 在不含尿嘧啶和组氨酸的基本培养基筛选转 化子获得了钾离子转运蛋白TRK1 和TRK2 基因缺失的酿酒酵母钾素营养缺陷型菌株, 该菌株在低 + + K 培养基中导入拟南芥K 转运体基因AtKuP1 可恢复正常生长。 关键词: 酵母, TRK1、TRK2 吸钾基因缺陷型, 同源重组 The Defective Potassium Uptake by TRK1 and TRK2 Mutant of Saccharomyces cerevisiae Using Homologous Recombination GUO Zhao-Kui1* YANG Qian1 YAN Pei-Qiang2 WAN Xiu-Qing2 YAO Quan-Hong3 (1. Department of Life Sciences Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150001) (2. Heilongjiang Tobacco Research Institute, Mudanjiang 157011) (3. Shanghai Academy of Agricultural Science, Shanghai 201106) Abstract: In order to perform the regulation and functional study and the screening of potassium uptake genes, the high affinity K+ uptake genes TRK1 and TRK2 in Saccharomyces cerevisiae were replaced with URA3 and HIS3 alternately using the methods of homologous recombination. URA3 and HIS3 of S. Cere- visiae were used as marker gene, the def

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