动物外周血单个核细胞分离方法探讨.PDFVIP

第３２卷 第６期 世界科技研究与发展 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．６ 　 　 ２０１０年１２月 ８３５－８３９页 ＷＯＲＬＤＳＣＩＴＥＣＨＲ＆Ｄ Ｄｅｃ．２０１０ ｐｐ．８３５－８３９ 动物外周血单个核细胞分离方法探讨 １，２ ２ １，２ ２ １ １ 胡永波 　展群岭 　刘海朋 　霍　康 　杨德雨 　徐鸣明 １，２ ２ １，２ ，１，２ 张英英 　何　丰　胡子成 　谢　鹏 （１．重庆医科大学附属第一医院神经内科；２．重庆医科大学神经科学研究中心，重庆４０００１６） 摘　要：目的探索用人淋巴细胞分离液分离多种属动物外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）的可行性及评价其分离效果，建立一种适于 野外大规模多种属动物ＰＢＭＣｓ的分离方法。方法 采用人淋巴细胞分离液分离来源于新疆的伊犁马、新疆驴、不同品种犬、新疆双 峰驼、天山马鹿和来源于重庆的荣昌猪、中国荷斯坦奶牛、简阳大耳黑山羊外周血ＰＢＭＣｓ。随机抽样检测分离的动物ＰＢＭＣｓ细胞 总数、细胞纯度和细胞活率。结果 用人淋巴细胞分离液成功分离上述８种动物ＰＢＭＣｓ，每毫升动物外周血分离的ＰＢＭＣｓ细胞总 ６ ６ 数为０５２×１０～２０３×１０个，纯度为６７％～９３％，细胞活率为９２５％～９８０％。结论 用人淋巴细胞分离液分离多种动物ＰＢ ＭＣｓ的方法宜在动物的病毒分子流行学调查中进一步推广。 关键词：动物；细胞分离；外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）；Ｆｉｃｏｌｌ密度梯度离心法 中图分类号：Ｒ１８１．２＋４　　　文献标识码：Ａ　　　 ＤｉｓｃｕｓｓｉｏｎｏｎＭｅｔｈｏｄｆｏｒＳｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＡｎｉｍａｌＰｅｒｉｐｈｅｒａｌＢｌｏｏｄＭｏｎｏｎｕｃｌｅａｒＣｅｌｌｓ １，２ １ １，２ １ １ １ ＨＵＹｏｎｇｂｏ 　ＺＨＡＮＱｕｎＬｉｎｇ　ＬＩＵＨａｉｐｅｎｇ 　ＨＵＯＫａｎｇ　ＹＡＮＧＤｅｙｕ 　ＸＵＭｉｎｇｍｉｎｇ １，２ ２ １，２ ，１，２ ＺＨＡＮＧＹｉｎｇｙｉｎｇ 　ＨＥＦｅｎｇ　ＨＵＺｉｃｈｅｎｇ 　ＸＩＥＰｅｎｇ （１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６； ２．ＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａａｖａｉｌａｂｌｅｍｅｔｈｏｄｔｏｓｅｐａｒａｔｅｔｈｅｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ（ＰＢＭＣｓ）ｆｒｏｍｍａｎｙｋｉｎｄｓｏｆａｎｉ ｍａｌｓａｄｏｐｔｉｎｇｈｕｍａｎｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＰＢＭＣｓｉｎｔｈｅｂｌｏｏｄｏｆＩｌｉｈｏｒｓｅｓ，Ｘｉｎｊｉａｎｇｄｏｎｋｅｙｓ，ｃａ ｎｉｎｅｓ，ＸｉｎｊｉａｎｇＢａｃｔｒｉａｎＣａｍｅｌｓａｎｄＴｉａｎｓｈａｎｒｅｄｄｅｅｒｆｒ