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杆状病毒蛋白激酶调控多角体组装和病毒感染的研究
目 录
摘 要……………………………………………………………………………………………………………………．．3
ABSTRACT………………………………………………………………………………………………………………．5
中英文对照表…………………………………………………………………………………7
第一章 文献综述…………………………………………………………………………一9
1．1研究背景………………………………………………………………………………一9
1．1．1杆状病毒概述………………………………………………………………………9
1．1．2杆状病毒分类………………………………………………………………………9
1．1．3杆状病毒的病毒体形态…………………………………………………………．10
1．1．4杆状病毒的生活史………………………………………………………………．11
1．1．5杆状病毒的基因表达……………………………………………………………．12
1．1．6杆状病毒的基因组………………………………………………………………．13
1．1．7杆状病毒应用……………………………………………………………………．14
6
1．2蛋白激酶(PK)的简介…………………………………………………………………1
1．2．1病毒的相关蛋白激酶……………………………………………………………．16
1．2．2杆状病毒编码的蛋白激酶PK．1…………………………………………………17
1．2．3杆状病毒蛋白质磷酸化及多角体组装…………………………………………．18
1．3本实验的目的与意义……………………………………………………………………………．19
2．1实验材料………………………………………………………………………………20
2．1．1实验仪器…………………………………………………………………………………………………．．20
2．1．2菌种和质粒………………………………………………………………………．20
2．1．3载体…………………………………………………………………………………………………………．20
2．1．4细胞系及培养基…………………………………………………………………．21
2．1．5酶、抗生素及相关试剂…………………………………………………………．21
2．1．6相关试剂的配制…………………………………………………………………．22
2．1．7
SDS．PAGE缓冲液及相关试剂的配制…………………………………………．23
2．1．8引物…………………………………………………………………………………………………………．23
2．2实验方法………………………………………………………………………………24
2．2．3PCR回收产物酶连反应…………………………………………………………．26
2．2．4
CaCl2法制备大肠杆菌的感受态细胞……………………………………………26
2．2．5感受态细胞DH5Ⅱ的转化…………………………………………………………………27
2．2．6大肠杆菌中一般质粒的提取……………………………………………………．27
2．2．7酶切反应…………………………………………………………………………．28
2．2．8目的基因酶连载体………………………………………………………………．29
2．2．11细胞的转染感染…………………………………………………………………30
2．3实验结果与分析………………………………………………………………………32
万方数据
2
2．3．1各目的片段的克隆………………………………………………………………．32
2．3．2重组质粒的构建…………………………………………………………………．33
2．3．3构建重组Bacmid…………………………………………………………………34
2．3．4转染感染……………………………………………………………………
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