柑橘溃疡病防治药剂的探究.pdfVIP

柑橘溃疡病防治药剂的研究 姓名：覃旭 导师：邓业成 专业：植物学 研究方向：植物生理学 年级：2007 级 摘要 本文针对柑橘溃疡病对我国柑橘产业的严重危害，从植物源杀菌剂和化学杀菌药剂两 个方面对柑橘溃疡病菌的防治药剂进行了室内研究。 在抗菌植物活性筛选中，以采自广西北部及桂东南地区的 90 个科共 193 种植物为筛 选对象，植物材料经甲醇冷浸提取后，测定了 193 种植物提取物对柑橘溃疡病菌的抗菌活 性。在抗菌活性筛选的基础上，进一步对抑制活性较高的 2 种中药植物广东蛇葡萄 Ampelopsis cantoniensis (Hook. et Arn.) Planch.和猴耳环 Pithecellobium clypearia (Jack) Benth.进行抗菌活性成分分离，并鉴定出活性成分的结构，初步研究了两种中药植物对柑 橘溃疡病菌的抗菌作用机制。对目前生产上常用的 14 种杀菌药剂进行了抑菌活性筛选， 并将植物提取物与杀菌药剂进行二元复配，初步研究了混配剂对柑橘溃疡病菌的抑制活 性。 采用带药平板涂布法测定了 193 种植物提取物的抑菌活性。结果表明：在 10mg/mL 的质量浓度下，有 15 种植物提取物的抑菌活性好，72h 能完全抑制柑橘溃疡病菌的生长， 它们分别是广东蛇葡萄、猴耳环、枫杨、钩吻、黔桂千金藤、广西地不容、杠板归、扁担 藤、桉、番石榴、细叶桉、厚皮香、老虎刺、大青和榄李；有金毛狗和山莓 2 种植物提取 物 48h 完全抑制柑橘溃疡病菌的生长；而 24h 完全抑制柑橘溃疡病菌生长的植物提取物共 计 23 种，分别为买麻藤、马甲子、虎杖、水石榕、黄金凤、中华猕猴桃、金线吊乌龟、 木防己、野漆、盐肤木、朝天罐、金钱柳、野鸭椿、四川大头茶、细齿叶柃、木荷、长毛 柃、油茶、岭南山竹子、红背山麻杆、叶下珠、海漆和石菖蒲。 在室内进一步测定了这 15 种植物提取物对柑橘溃疡病菌的最低抑菌浓度（MIC ）。发 现广东蛇葡萄和猴耳环提取物对柑橘溃疡病菌的抑制活性最高，MIC 均为 2mg/mL ；其次 是枫杨、钩吻、黔桂千金藤和广西地不容提取物，MIC 分别为 6mg/mL、6mg/mL、8mg/mL 和 8mg/mL；其余9 种植物提取物的 MIC 均为 10mg/mL。 分别测定了广东蛇葡萄枝和叶提取物以及猴耳环枝、叶和花提取物的抑菌活性，发现 两种植物的活性成分在枝和叶中均有分布，且主要存在于叶中。其中，广东蛇葡萄枝和叶 提取物对柑橘溃疡病菌的 MIC 分别为 4mg/mL 和 2mg/mL ；猴耳环枝、叶和花的MIC 分别 为 4mg/mL 、2mg/mL 和 4mg/mL 。 采用有机溶剂液-液萃取法将广东蛇葡萄枝和叶提取物初步分成石油醚萃取物、乙酸乙 酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物 4 个部分，经活性测定，表明枝和叶抗菌活性成分均 主要存在于乙酸乙酯萃取物中。广东蛇葡萄乙酸乙酯萃取物经 4 次硅胶柱层析后获得活性 流分 2-11 。同法对猴耳环枝和叶提物物进行了初步分离，将提取物初步分为石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物4 个部分，经活性测定，发现猴耳环枝和叶抗 菌活性成分均主要存在于乙酸乙酯萃取物中。通过反复硅胶柱层析和薄层层析，结合活性 跟踪，从猴耳环乙酸乙酯萃取物中分离获得 1 个活性化合物，经核磁共振（NMR ）和质谱 （MS ）解析，鉴定为没食子酸甲酯。没食子酸甲酯对柑橘溃疡病菌的最低抑菌浓度为 1mg/mL。 对目前生产上常用的 14 种杀菌药剂进行室内抑菌活性筛选，采用带药平板涂布法测 定了 14 种杀菌药剂对柑橘溃疡病菌的最低抑菌浓度（MIC ）。在 14 种供试药剂中，其中 10 种杀菌药剂 60% 甲硫·异菌脲 WP 、80%代森锰锌 WP 、72%农用链霉素 SP、2%加收米 SL、硫酸铜晶体、53.8%可杀得 WDG 、25% 甲霜灵WP 、64%杀毒矾 WP 、20%叶枯唑WP 和 58% 甲霜·锰锌 WP 对柑橘溃疡病菌的 MIC