棘胸蛙(Quasipaa spinosa)体内生物钟系统对机体抗氧化能力的调控机制探究.pdfVIP

Dissertationformaster 唧M匝CHANISM0F RE 0ⅪDATIONSISTANCE REGULATEDBYCIRCADIANCLOCK SYSTEMrNGIANT SPINYFROG SPINOSA QUASIPAA Candidate：XIE Zhanwang sor：XIE Supervi Zhigang Discipline：Ecology College Science ofChemistry＆Life Normal 321 ZhejiangUniversity,Jinhua004，Zhejiang 万方数据 棘胸蛙(Quasipaaspinosa)体内生物钟系统对机体抗氧化能 力的调控机制研究 摘要 生物钟一直倍受关注，然而到目前为止，确切的生物钟运行分子调控及维持 过程仍然没有得到完全的阐释，而且不同种属的研究结果存在较大的差异。对生 物钟系统的研究主要集中在啮齿类和鱼类的模式物种，只有少量关于两栖类的研 究，因此开展该方面的研究有助于进一步阐明不同类群生物的昼夜节律系统运行 机制。生物体内氧化压力的产生已经被证实具有周期性，相对应地，抗氧化系统 的节律性防御可以有效地缓解氧化损伤。大量证据将这一现象与生物钟联系在一 起。因此，本研究将重点关注生物钟在控制两栖类抗氧化功能方面的调控机制， 以期理解两栖类如何缓解和消除这些压力导致的氧化损伤。 本研究以棘胸蛙为实验对象，探究其神经视网膜、脑、肝脏内主要生物钟基 因表达以及节律信号激素分泌的昼夜节律模式，还检测了抗氧化酶基因表达的时 间模式及体内氧化状态、抗氧化能力的时间变化，以期发现生物钟在调控机体抗 氧化能力的相关证据和作用机制。主要结果和结论如下： SE(A)／AO．3)，其他脑生物钟基因均表现出明显的昼夜节律性，并在在6：00(光 个钟基因表达的时间模式未出现同步性，其中Bmall无节律，Cryl有显著的昼 夜差异(白天高于夜晚)，而Clock和Per2的表达虽然表现出一定的节律性，但 是并不同步。棘胸蛙视网膜和脑组织生物钟基因表达的振荡模式符合哺乳动物中 提出的转录．翻译正负反馈模型；肝组织生物钟可能由于Brnall基因表达的不规 律，使肝生物钟系统整体昼夜节律没有同步性，从而导致缺乏CLOCK：BMALI 异二聚体对肝组织生物钟系统的周期性调节，最终使得肝组织中由生物钟调控的 相关生理生化反应更容易受到其他因素(如投喂时间)的影响而表现出独特的节 律性。 (2)棘胸蛙视网膜中褪黑激素合成酶Aamt表达与生物钟基因同时在6：00达到 峰值(口0．05)，脑组织和肝组织没有检测到Aamt的表达。在视网膜和脑组织 中检测到褪黑激素受体Meglc的表达，并且在脑中表现出显著的昼夜节律，峰 万方数据 暂的高表达，可能的原因是Aanat受到CLOCK：BMALl异二聚体的上调，但是 CLOCK：BMALl异二聚体激活转录的能力立即被同一时间点高表达的Cryl、 Per2蛋白产物所抑制，使得Aanat基因转录受到抑制。值得注意的是，棘胸蛙肝