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拟南芥miRNA172a-1b-2c对多种胁迫响应的探究
目 录
摘 要 ……
A B S 下R A C 下 …… 2
第 一 章 弓! 言……,……3
1 nl ic ro R N A …… 3
1.1 m icroR N A 概 述 ······································……3
1.2 m iCroR N A 与 非 生 物 肋、迫 之 间 的关 系 ……3
1.3 m icroRN A 调控 植物 的生长 发 育 ……,……4
2 而 R 172 自勺研 究状 祝 及 意 义 ……5
3 前 期 研 究 ……,……7
第二 章 材 料 一与方法 ································,·····································……9
l 材 料 ……9
1. 1 拟 南 芥 ……9
1.2 菌株 和 载 体 .,·.··········································……9
1.3 试 剂 和 仪 器 ·.·······················……9
2 方 法 二,……10
2.I R丁一pCR 研 究 目标基 因 的表 达模 式 ……10
2.2 植物表 达载 体 的构 建 和拟 南芥 的转化 ……n
2.3 拟 南 芥 的胁 迫 处 理 实验 ……14
2.4 pEG 处 理 后 的 电导 率 的测 定 ……15
第 三 章 结 果 ……16
l ;11iRN A !72 a一1/b一2/c)字列 的 比对 与 聚类 分 析 ……16
Z At lniR1 72a一l/a一2/b一!/b一2/c 前 体 均 含有 胁 迫 响应 元 件 ……17
3 A tm iR 172s 不 同成 员在 不 同肋、迫条件 (Z h ) 下受 到诱 导 ……18
4 ,niR 172a一1/b一2 参与 拟 南 芥 对 LICI,M annitol胁 迫 的响应 ……,……19
S A tllliR 172c 受 到 干 旱 肋、迫 的显 著性诱 导 ……20
第 四章 讨 论 ……22
l ,111R1 72 的功 能 ··························…·…22
2 小结 ……23
附录 水稻花 发 育相 关基 因 的克 隆和研 究……24
第一 章 引 言……24
第一 草一材 料和力一法 ……,……26
l 材 半1.“……,……26
1. 1 植 物材 料 ……26
1.2 菌 株和 载 体 ……,……,……26
1.3 试 剂和 仪 器 ……,..……,……,……26
2 方 法 ……,二2 6
2.1 基 因序 列 的 比对 及 聚类 分析 ……26
2.2 洋 葱表 皮细 胞 定 位 实 验 ……,……27
2.3 Re 。}一tim e pC R 研 究 目标基 因 的表 达 模 式 ..……,……,……30
2.4 植 物表 达 载 体 的构建 和 水 稻 的转 化 ……,……30
2.5 农杆 菌 介 导水 稻 转基 因 ……3 1
2.6 转 基 因水 稻 阳性 植 株 筛选 ……36
2.7 水 稻 OSAI巧 基 因激 素 诱 导表 达 模 式 ……37
2.8 水稻 。AILS 基 因不 同胁迫诱 导表达 模 式 ……37
2.9 原 位 杂 交 ……37
第三 章 结 果……,……4 3
l 基 因序 列 的 比对 、聚类 分析及进 化 分析 ……43
1.1 基 因序 列 的 比对 ……4 3
1.2 基 因序 列 的聚类进化 分析 ……45
2 载 体 构 建 ……4 6
2.1 O SA 几基 因 的获得 ……4 6
2.2 OSAI乙5一pcA M BIA 1304 载 体 的构 建 ……4 6
2.3 将 。5月l[5一pcA M BIA 1304 表 达 载 体 构 建 到农
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