盐芥根响应高盐的microRNA的分离及验证.pdfVIP

摘 要 microRNA(miRNA)是真核生物及病毒中存在的由19～25nt组成的一类内 源性非编码的单链小RNA，主要是在转录后水平发挥调控基因表达的功能。植 物miRNA中的调控作用不仅涉及植物的整个生长发育进程(如植物组织器官发 育)，而且参与植物对多种逆境胁迫(如营养胁迫、干旱胁迫、高盐胁迫、低温 胁迫等)的响应。 o 近年来盐芥(Theihmgiellahalophila，又称zsalsugmea)作为盐生模式植物， 其抗盐机理备受关注。本研究以高盐处理前后的盐芥根为材料，进行了盐芥根响 应高盐的miRNA分离、鉴定与验证研究，获得的结果如下： RT-PCR和miRNA基因芯片验证 miRNA、12个下调miRNA。采用了stem．100p Solexa数据的准确性。 植物miRNA在发挥作用时一般以完全互补或近乎完全互补的方式对靶基因 进行切割，降解靶基冈。冈此利用psRNA软件预测高盐响应miRNA的靶基因， 由于盐芥基因组信息未知，采用EST代替基凶组进行预测，共得到了13个miRNA 其靶基因发挥各种调控功能。 RLM．5’RACE方法得到了新3号miRNA对其靶基因71ll的切割位点，位于结 合位点上游42bp处。证实了miRNA通过在特定位点切割靶基因使其降解，发 挥调控功能。 上述结果为研究miRNA在响应高盐胁迫中的调控作用提供了基础数据，同 时为研究盐芥的耐盐分子机理提供了重要的依据。 RTPCR 关键词：盐芥，rniRNA，Solexa测序，stem．100p Abstract is in and formeda microRNA(miRNA)whichpresenteukaryotesviruses，isby 19—25nt classof small arole RNA，and endogenousnon-codingsingle—stranded plays inthe of levels．miRNAin not post_transcriptiDnalregulationgeneexpression plants the ofthe and of as regulates only processgrowthdevelopmentplants(suchplant tissueand alsoinvolvesina of stress organdevelopment)，but variety responses(such asnutrient salt stressetc．) stress，cold stress，droughtstress，high Inrecent asalt years，Thelhmgiellahalophila(Z modelto salsuginea)，as plant thesalttolerancemechanism．ismoreandmoreconcemedscientis