金鱼Stritin基因对金鱼胚胎发育的调控功能分析.pdfVIP

密级 学校代码 !Q5垒2 金鱼Striatin基因对金鱼胚胎 发育的调控功能分析 Functionalofstriatinin Analysis gene Goldfish RegulatingEmbryonic Development 指导教师姓名、职称 奎互猩 敛援 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一一年五月 i i ii ㈨III iiirIll l l l l llf Y1911582 摘 要 蛋白磷酸酶．2A(PP2A)，是真核生物体内最主要的一种蛋白磷 酸酶，它是一个异源三聚体，包括支架蛋白A亚基、催化C亚基以 及调节亚基B。目前的研究表明调节亚基B，由超过16个不同基因 编码，因此，除了有调节PP2A活性的功能之外，很可能还有其它的 功能。 为了研究PP2A调节亚基在脊椎动物发育过程中充当怎样的角 色，我们克隆了金鱼PRl 并且我们在金鱼的组织及胚胎中分析了这两个基因的组织特异性及 核苷酸，推测其编码782个氨基酸；SG2NAa基因包含一个2118 bp 的开放阅读框，推测其编码705个氨基酸，其另外的一个变体SG2NA[3 包含一个2148 IO／BⅢ bp的开放阅读框，推测其编码715个氨基酸。PRl 的这两个异构体与其它物种之间显示出很高的同源性。 能目前还不是很清楚。本研究为了进一步研究Striatin基因在低等脊 椎动物中的功能，首先，我们从金鱼的脑中提取了RNA，并通过反 转录得到了striatin 左右带酶切位点的基因片段。其次，使用反义RNA技术，前面得到 的基因片段可以被反向的插入到pEGFP．C3载体(一种绿色荧光蛋白 我们的结果显示：85％左右 ：通过对异常眼睛的石蜡切 片，我们发现金鱼胚胎眼睛的晶状体有明显的纤维症状，以及晶状体 与视网膜上皮之间的间隙相对正常眼睛来说变得更加狭窄。此外，异 常胚胎的眼睛中视网膜上皮细胞呈现不规则状态及增厚的现象。从这 些结果我们不难看出Striatin基因在金鱼胚胎发育的过程中起着重要 的作用。 关键词：金鱼，PP2A，striatin，基因表达，分子克隆，胚胎发育， 显微注射，表型缺失 Ⅱ ABSTRACT The ofthe or proteinphosphatase一2A(PP-2A)，one maj in a ofascaffoldA phosphataseseukaryotes，isheterotrimer,consisting subunit，a Csubunitanda