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酿酒酵母ALD4基因敲除及GPD1基因沉默研究
摘要
中文摘要
乙酸与甘油是酿酒酵母乙醇发酵过程主要的副产物。本研究通过敲除酿酒酵母
表达载体抑制酿酒酵母甘油脱氢酶关键基因GPDl的转录，以促进乙醇发酵。结果如
下：
缺失菌株DY01发酵液乙醇比出发菌株酿酒酵母Y01提高了6．88％。
降了24．03％；甘油产量含量下降幅度最大达到了25．43％，而且甘油含量的下降滞
后于3．磷酸甘油脱氢酶活性的下降。
了9．74％，比原始菌株Y01乙醇含量提高了14．01％。
是进行酿酒酵母基因改良育种与酿酒酵母基因功能相关研究的有效方法，突破了工
业酿酒酵母缺乏有效选择标记与遗传多样性的限制。酿酒酵母ALD4基因的缺失，
GPDJ基因mRNA5’UTR的反义
有利于乙醇代谢途径。酿酒酵母工程菌株DY01
RNA能够有效的抑制酿酒酵母工程菌株DY01GPDl基因的转录，触发沉默该基因
的表达；为提高甘蔗等生物质发酵燃料乙醇效率迈出重要一步，为酿酒酵母工程菌
的基因改良奠定了基础。
关键词：酿酒酵母乙醛脱氢酶甘油脱氢酶反义技术基因敲除同源重组
Abstract
Abstract
the in cerevisiae
Aceticacidand are Saccharomyces
glycerolmajorby-product
ethanolfermentation．Inthis Y01 ALD4
gene
paper,S．cerevisiaealdehydedehydrogenase
was deletionmutantsDY01WaSobtained．The of
disrupted．ALD4gene production
S．cerevisiaeethanolWaSincreaSedGPDlsilencedviaantisense vector．The
by expression
resultsweredescribedasfollows：
loxP-KanMX-loxPandCre／loxP todeletetheindustrial
1，PCR—baSed systemapply
strainS．cerevisiaeY01 ALD4 ofethanol
production
aldehydedehydrogenasegene．The
with to strainY01．
was the
improved6．88％comparedoriginal
Antisense vector
GPDl5UTR
2，Glyceroldehydrogenasegene expression
tothe
wasconstructedforS．cerevisiaeINVScl．When original
pYES2．0一G
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