转录因子Mtf1及分子伴侣Hsp60相互作用对裂殖酵母线粒体基因转录的研究.pdfVIP

指 导小组成 员名 单 A lastair 教授 陈东 戎 副教授 孙 文夏 工程 师 目录 摘 要 ……，…… 1 A b stra Ct …… 2 第一 章 综述 ……3 1 线粒体 基 因转 录 ……，··································……3 1.1 线粒体 功 能和研 究意义 ·.······························，················，······……3 1.2 线粒 体 基 因转录研 究进 展 ……3 1.3 裂殖 酵母 线粒体 基 因转录研 究进展 .……，……4 2 分子伴 侣 Hsp 印 与线粒体 基 因转 录 ……5 2.IH sp 印 功 能和 研 究意义 ·.·························································……5 2.2 Hsp 印 和 线粒 体转 录 因子 M tfl 相 互作用 研 究进展 ……6 3 叮B 介绍 ……7 4 本 文研 究意 义 ··.·..·...·...·····……7 第 二 章 分子 伴 侣 日sp60 与线粒 体转 录 因子 M tfl 体 内相 互作 用 ……9 1 材 料 和仪 器 ……9 1.1 质 粒 ……9 1.2 引物 序 列 ·························……10 1.3 培养 基 ……，……10 1.4 酵母 转 化 实验 试 剂 ··················································……1o 1.5 串联 亲和纯 化 (TA P)实验 试剂 ……，……10 1.6 sD s一PA GE 相 关试 剂 .，····································……12 1.7 仪 器 ……，……，……13 2 方 法 …，……，……13 2.1 菌株 的构建 ·.······························……13 2 .2 串联 亲 和 纯 化 (TA P)··············································…·…巧 2.3 蛋 白质 的检 测 与验 证 ·················································……17 2.4 质 谱 检 测 ……18 3 结 果 ……18 3.1 TA p 实验 结果 与 分析 ········4·································……18 3.2 M A LDI一下O 「M S 实验 结 果 与分析 ……19 4 讨 论 ……20 第 三 章 分子 伴侣 Hsp60 与线粒 体 转 录 因子 M tfl 体 外相 互作 用 ……22 1. 材 料和 仪 器 ……22 1.1 质粒 ……22 1.2 引物 序 列 ……22 1.3 培养基 ……23 1.4 其 它 试 剂 ……23 1.5 仪 器 ……，……24 2. 方 法 …… 24 2.1 质粒 的构 建 ……，……，……24 2.2 重组蛋 白的表达纯 化 ……26 2.3 G S丁一pull dow n 实验 ……，……，……27 2.4 表 面等 离子共振 (S。rface Plasm on Reson ance，sPR) ……27 3. 结 果 ……3 1 3.1 体外 G sT一Pu lldow n 实验 结果与分析 ……3 1 3.2 表 面等 离子共 振 (SPR )实验 结 果与 分析 ……32 4 讨 论