量子点荧光探针的制备和其在金黄色葡萄球菌检测中的应用.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 10542 4020052 学号20081 量子点荧光探针的制备及其在金黄 色葡萄球菌检测中的应用 of fluorescentdots Preparation quantum and their in probes appfication detecting aureus ．staphylococcus 指导教师姓名、职称 墅巫 ．鏊撞 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一一年五月 l l 1ill III Ill ll l ㈨III lll {Y191 3021 摘 要 水溶性量子点是一种有着优良光学特性的半导体纳米微粒，可在 生命科学研究中作为荧光探针和标记。与传统的有机染料荧光探针相 比，它具有激发光谱宽、发射光谱对称且半峰宽窄、光化学稳定性高、 谱带分布连续以及抗光漂白能力强等特点。本文以CdSe／ZnS量子点 为研究对象，改进其水相合成法，并应用于致病菌的检测，主要开展 了以下两个方面的工作： 1．水相合成CdSe、CdSe／ZnS量子点。为解决在非水相中合成量 子点的毒性大、反应条件苛刻、非水溶性等问题，本研究以NaHSe 为前体、巯基乙酸为稳定剂合成了的水溶性CdSe量子点，并在CdSe 量子点基础上合成了具有更高量子产率的CdSe／ZnS核壳量子点。着 重考察了稳定剂、pH值、反应量等因素对量子点荧光特性的影响， 并对制备后的粗产品进行了提纯，以及用荧光光谱、透射电子显微镜 等对合成的量子点进行了表征。实验结果表明，该制备方法简单而快 速，最终能得到具有良好的荧光性能和稳定性的水溶性CdSe、 CdSe／ZnS量子点。 2．检测含毒性休克综合征毒素．1基因的金黄色葡萄球菌。利用量 子点(QD)作为供体、黑洞猝灭染料(BHQ)为受体的荧光猝灭原 理，建立了一种新的快速检测含毒性休克综合征毒素．1基因的金黄色 葡萄球菌的方法。在本检测体系中，羧基修饰的量子点(530nm)与 氨基修饰的DNA在EDC作用下脱水结合形成量子点核酸探针，再 序列后，靶序列通过更强的亲和力与QD-DNA探针杂交而BHQ与 QD分离，QD复合物的荧光复原。而加入误配碱基序列和其它菌的 DNA时，量子点的荧光强度不会复原。实验结果表明，通过检测QD 荧光的变化可对携带缸f基因的金黄色葡萄球菌进行定量检测，且此 检测方法具有高的灵敏性和特异性。该方法中目标DNA的浓度与量 子点复原的荧光强度与呈良好的线性关系，线性范围为0．2～1．2 IlM， 目标DNA的检测下限可达0．21．tM。 关键词：量子点，制备，荧光能量共振转移，金黄色葡萄球菌，tst ABSTRACT Water-soluble kind