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离工程思考题(
(—)
1 生物工程下游技术的主要内容、根本任务和主要目标?
2 生物产品与普通化工产品分离过程有何不同?
3 设计生物产品的分离工艺应考虑哪些因素?
4 初步纯化与高度纯化分离效果有何不同?
5 分离纯化的得率与纯化倍数如何计算?
6 现化生物分离技术研究方向有哪些特点?
(二)
1.为什么要进行发酵液预处理?处理的目标及内容分别是什么?
①.发酵液多为黏度大的悬浮液;
②.目标产物在发酵液中的浓度常较低;
③.成分复杂,固体粒子可压缩性大,悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大。
因此,不易通过过滤或离心进行细胞分离。对发酵液进行适当的预处理,以便于固液分离,使后续的分离纯化工序顺利进行。
发酵液的预处理过程包括:①发酵液杂质的去除,包括除去杂蛋白、无机盐离子以及色素、热原、毒性物质等有机物质;②改善发酵液的处理性能,主要通过降低发酵液的黏调节适宜的PH值和温度、絮凝和凝聚。
2.发酵液金属离子的去除方法分别有哪些?
(1)钙离子的去除
加入草酸,生成草酸钙,沉淀去除。
草酸与镁离子结合生成草酸镁,去除Mg2+
草酸酸化发酵液,改变其胶体状态,有助于目标产物转入液相。
在用量大时,可用其可溶性盐。
反应生成的草酸钙还能促使蛋白质凝固,提高滤液质量。
(2)镁离子的去除
可加入三聚磷酸钠,形成络合物。
还可用磷酸盐处理,大大降低钙和镁离子。
(3)铁离子的去除
一般用黄血盐去除,形成普鲁士蓝沉淀。
3.杂蛋白去除的方法和机理分别是什么?
去除方法主要有:盐析法、等电点沉淀法、加热法、有机溶剂沉淀法、吸附法等
盐析: 在蛋白质溶液中加入一定量的中性盐(如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等)使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析(salting out)。这是由于这些盐类离子与水的亲和性大,又是强电解质,可与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质颗粒表面的水膜。另外,大量中和蛋白质颗粒上的电荷,使蛋白质成为既不含水膜又不带电荷的颗粒而聚集沉淀。
等电点沉淀法: 处于等电点时,蛋白质分子之间的静电排斥力最小,使它失去了作为胶体体系稳定的基本因素,迅速结合成聚集体,极易沉淀析出。
有机溶剂法: 有机溶剂和水的亲和力大,能夺取蛋白质表面的水分子,即破坏蛋白质胶体的水化膜,同时也可降低溶液的介电常数,导致蛋白质分子间的静电引力增大,产生凝聚和沉淀。
发酵液处理性能的改善有哪些方法?
①降低发酵液的黏度,包括加热法和加水稀释法;②调节pH值;③絮凝
絮凝和凝聚的概念、机理分别是什么?
⑴絮凝是指在某些高分子絮凝剂存在下,基于架桥作用,使胶粒形成粗大的絮凝团的过程,是一种以物理的集合为主的过程。
⑵凝聚是指在中性盐作用下,由于双电层排斥电位的降低(或由于微粒所带电荷被加入的带有相反电荷的高价离子中和),而使胶体体系不稳定,微粒互相黏着在一起的现象。
有哪些絮凝剂可以使用?
从化学结构看,主要分为三类:高聚物、无机盐、有机溶剂和表面活性剂。
目前最常见的高聚物絮凝剂是有机合成的聚丙烯酰胺类衍生物、壳聚糖絮凝剂、聚苯乙烯类衍生物等。高聚物絮凝剂具有长链状的结构,利用长链上的活性基团,通过静电引力,形成桥架连接,从而生成菌团沉淀。
有机溶剂如乙醇、丙酮和甲醛等对发酵液的絮凝有一定的作用。表面活性剂如三异丙醇胺聚氧乙烯聚氧丙烯醚,也可以提高絮凝处理效果。
(三)
1. 固液分离的方法有哪些?其原理分别是什么?
固液分离的方法有分离筛、悬浮分离、重
力沉降以及离心和过滤等。 用于发酵液固液分离的主要是离心和过滤。
过滤就是利用多孔性介质(如滤布)截留固液悬浮液中的固体颗粒,从而实现固液分离。
离心:依靠惯性离心力的作用而实现的沉降过程。适用于两相密度差较小,颗粒粒度较细,在重力场中的沉降效率很低的非均相体系。
2. 生物产业过滤和离心分离常用的设备是什么?
在生物工业中,常用的过滤发酵液的设备主要有板框过滤机、加压过滤机和真空过滤机三类。
工业生产中主要采用沉降式离心机,包括碟片式离心机、管式离心机和倾析式离心机。
3. 改善过滤过程的方法有哪些?
①絮凝;②助滤剂,助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,悬浮液中的大量胶体粒子吸附在助滤剂表面,改变滤饼的结构,从而降低过滤的阻力;③反应剂,反应剂之间能互相作用或能和发酵液中的杂质反应,生成CaSO4、AlPO4等不溶性沉淀,从而提高过滤速率。
(四)
1.微生物细胞、植物细胞的细胞壁都分别具有哪些特点?
微生物 革兰氏
阳性细菌 革兰氏
阴性细菌 酵母菌 真菌 壁厚 20-80 nm 10-13 nm 100-300nm 100-250nm 层次 单层 多层 多层 多层 主要
组成 肽聚糖(40-90%)
多糖
胞壁酸
蛋白质
脂多糖(1-4%) 肽聚糖 (5-10%)
脂蛋白
脂多糖(11-22%)
磷脂
蛋白质 葡
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