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免疫的临床应用 (3)、间接凝集抑制试验 第二节 免疫学防治 提 要 免疫预防有人工主动免疫和人工被动免疫。人工自动免疫是人为地给机体注射含有具有抗原性的物质(疫苗),使机体主动产生特异性免疫力;人工被动免疫是直接给机体注射抗原特异性抗体等,使机体被动获得特异性抵抗力。 4、新型疫苗 亚单位疫苗 提取病原微生物中的有效抗原成分,制成疫苗。 基因工程疫苗 利用基因工程技术,将编码有效抗原的目的基因与载体重组后导入宿主细胞,随宿主细胞的增殖,目的基因表达大量的有效的抗原成分。 三、过继免疫 给患者转输能继续扩增的效应细胞的一种治疗方法。如:骨髓移植、LAK细胞法。 四、计划免疫 根据某些特定传染病的疫情监测和人群免疫状态分析,按照规定的程序有计划地进行人群预防接种,以提高人群免疫水平,达到控制以至消灭相应的传染病的重要措施。 谢 谢! 靶细胞 51Cr 洗涤 去除游离的51Cr 效应细胞 测量上清液中释放的51Cr 混合培养4-6小时 细胞毒试验(51Cr释放法)示意图 一、人工主动免疫 1、 死疫苗(灭活疫苗)是选用免疫原性强的病原体,经理化方法使其失去活力制备而成的疫苗。伤寒菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体、流感病毒、狂犬病病毒、乙脑病毒疫苗均为灭活疫苗。 2、 减毒活疫苗:是用减毒或无毒力的活病原体制成的疫苗。脊髓灰质病毒、卡介苗、麻疹病毒疫苗是常用的减毒活疫苗。 3、 类 毒 素:细菌外毒素经甲醛处理后,失去毒性而保留其免疫原性即为类毒素。常用的类毒素有破伤风类毒素、白喉类毒素等。 死疫苗和活疫苗的比较 一般单独使用 可多种疫苗混合使用 制品类型 较小 较大 不良反应 不易保存 易于保存 疫苗保存 长达3~5年以上 数月~1年 免疫力维持时间 可靠 较差 免疫效果 一般 只需一次 二次或多次 接种次数 较小 较大 接种剂量 多为模拟自然感染途径、少数经皮下注射 多采取皮下注射 接种途径 活疫苗 死疫苗 二、人工被动免疫 是给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂,以治疗或紧急预防感染疾病。人工被动免疫力维持的时间短,约2~3周。常用制剂有: 抗毒素 人免疫球蛋白制剂 细胞因子制剂 单抗/基因工程抗体 * * 第一节 免疫学诊断 一、抗原或抗体的检测 抗原-抗体反应包括沉淀反应、凝集反应、溶解反应、补体结合反应和中和反应等。 抗原-抗体反应可用已知的特异性抗体检 测未知的抗原;也可用已知的抗原检测未知的抗体。 免疫荧光技术、免疫酶技术、同位素标记技术、发光免疫分析等免疫标记技术提高了抗原抗体反应的敏感性。 (一)、抗原-抗体反应的特点 ?1、特异性:抗原-抗体的结合是特异性结合 ?2、可逆行:抗原抗体结合是分子表面的非 共价键结合 ?3、可见性:抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现象,于两者的分子比例密切相关 抗原抗体比例对反应现象的影响 (二)、抗原-抗体反应受多种因素影响 1 电解质:抗原-抗体反应通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液 ,以供给适应浓度的电解质。 2 温度:一般常使用反应在37度水浴 或孵育箱中进行。 3.酸碱度:抗原-抗体反应适应的酸碱度 为PH6~8。 (三)、常见的抗原抗体反应类型 1、凝集反应(Agglutination) 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象,称为凝聚反应。 (1)、直接凝集反应: 将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应,出现细菌凝集或红细胞凝集现象。又分为玻片法和试管法。 (2)、间接凝集反应: 将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面,与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。 血 球 凝 集 2、沉淀反应(Precipitation) 血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物,这一类反应称为沉淀反应。沉淀反应可在液体中进行,如絮状沉淀。大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质,进行琼脂扩散故也称免疫扩散。 (1)、单向免疫扩散(Single Immunodiffusion) 是将一定量已知抗体混于琼脂凝胶中制琼脂板,在适当位置打孔后将抗原加入孔中扩散。抗原在扩散过程中与凝胶中的抗体相遇,形成以抗原孔为中心的沉淀环,环的直径与抗原含量成正比相关。本法常用于测定血清IgG、IgM、IgA 和 C 3等的含量。 含抗体的凝胶 沉淀环 (2)、双向免疫扩散 (Double Immunodiffusion) 是将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中,二者
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