小鼠瘦素（LEP）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书.PDFVIP

小鼠瘦素（LEP）酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相 关液体样本中瘦素（LEP ）的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠瘦素（LEP ）水平。用纯化的小鼠瘦素（LEP ） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入瘦素（LEP ），再与HRP 标 记的瘦素（LEP ）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深 浅和样品中的瘦素（LEP ）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通 过标准曲线计算样品中小鼠瘦素（LEP ）浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片（48 ） 2 片（96 ） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：9μg/L 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml ×20 倍）×1 瓶 （20ml ×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/ 1 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分 钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS （PH7