试论参附注射液对阿霉素致心肌细胞钙超载的影.docVIP

　　试论参附注射液对阿霉素致心肌细胞钙超载的影 毕业 摘要： 【目的】观察参附注射液对阿霉素致心肌细胞钙超载的影响。【方法】选用SD大鼠随机分为正常对照组，正常生理盐水组，阿霉素组，阿霉素加生理盐水组，参附注射液低、中、高剂量组（剂量分别为0.3、0.6、1.2g·kg-1·d-1）；除２个正常组外，其他组均采用阿霉素腹腔注射复制模型，参附注射液组同时给药2周；造模3周后急性分离单个心肌细胞，采用离子图像法检测各组心肌细胞内游离Ca2+浓度，膜片钳技术记录各组细胞膜上L残透仆ǖ赖缌鞯谋浠。【结果】阿霉素组心肌细胞内游离Ca2+水平显著升高，细胞膜上L残透仆ǖ赖钠骄开放概率增加，平均电流幅度显著增大（Plt;0.05或Plt;0.01）；参附注射液高、中、低剂量均可显著降低心肌细胞内Ca2+水平，降低细胞膜上L-型钙通道的平均开放概率及平均电流幅度（均Plt;0.05），而各剂量组间作用ycin，ADR)是临床上常用的蒽环类抗肿瘤药物，有抗瘤谱广、作用强的特点。然而，ADR具有严重的心脏毒性作用，出现剂量依赖性的心律失常，甚至心衰，和其他抗癌药物同时应用还可加重心肌的损害。因此心脏毒性成为ADR提高剂量或联合用药的主要障碍［1］。研究表明［2］，ADR心脏毒性作用机制主要集中在自由基的生成、细胞内钙超载、核酸的合成障碍和能量代谢障碍等方面。参附注射液是由人参(红参)、附片(黑附子)等中药提取物混合而成，主要有效成分为人参皂苷和乌头类生物碱，具有保护心肌超微结构、抗心律失常、增加冠脉血流量、抗脂质过氧化等作用［3］。参附注射液可减少ADR心肌毒性［4］，并通过抗自由基来保护阿霉素心肌损伤［5］。钙超载是阿霉素产生心肌毒性作用，导致心衰的1个重要因素［6］。本文从钙超载途径观察参附注射液对ADR心脏毒性的保护作用，现报道如下。 （转载自中国评价网.nseac. ） 　　1 材料与方法 　　1.1 动物 SD大鼠，SPF级，体质量180～200g，雌雄兼用，由广州中医药大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK粤2003 0001。 　　1.2 主要仪器与试剂 CK40型光学倒置显微镜 (日本Olympus)；ST4040型染色机(德国)；EG1160型石蜡包埋机(德国)；心脏Langendorff灌流系统由埃德仪器（上海）国际贸易有限公司提供；AXT0SK0P2型正置显微镜(德国ZEISS)；LP5150型TillVision图像处理系统（德国）；EPC9型膜片钳放大器（德国）；MP285型微电极拉制仪（美国）；Pulse＆Pulsefit和TAC数据采集和信号分析处理系统（德国）；阿霉素(浙江海正药业有限公司，批；参附注射液(雅安3九药业有限公司，批；牛血清白蛋白（BSA，Roche分装)；Ⅰ型胶原酶(gCl2、5mmol/LGlucose，用NaOH调至pH值为7.2～7.4。高钾溶液：70mmol/LL睪lutamicacid、25mmol/LKCl、20mmol/LTaurine、10mmol/LKH2PO4、3mmol/LMgCl2、10mmol/LGlucose、10mmol/LHEPES、0.5mmol/LEGTA，用KOH调至pH值为7.2～7.4。电极内液：110mmol/LBaCl2、10mmol/LHEPES，用BaOH2调pH值至7.2～7.4。电极外液：140mmol/L天门冬酸钾、10mmol/LEGTA、10mmol/LHEPES、5mmol/LGlucose、0.001mmol/L河豚毒素（TTX），用KOH调pH值至7.2～7.4。 　　1.4 分组及给药 SD大鼠随机分为正常对照组，正常生理盐水组，阿霉素组，阿霉素加生理盐水组，参附注射液低、中、高剂量组（简称参附低、中、高剂量组）。每组8只，雌雄各半。正常对照组：不做特殊处理。正常生理盐水组：腹腔注射生理盐水。阿霉素组：实验开始后第2、4天腹腔注射1mg/kg ADR，第6、8天腹腔注射2mg/kgADR，第10、12天腹腔注射3mg/kgADR，第14、16天腹腔注射4mg/kgADR，16d累计用药剂量达20mg/kg；然后取左心室心肌组织，苏木素-伊红（HE）染色，镜下观察心尖处心肌细胞、细胞间质等的排列情况，确定造模成功与否。阿霉素加生理盐水组：造模后1周，腹腔注射等容积的生理盐水，每日1次，共2周。参附组：造模后1周，按高、中、低剂量组分别腹腔注射参附注射液0.3、0.6、1.2g/kg，每日1次，共2周。 中国大学排名 　　1.5 单个心肌细胞急性分离 造模3周后大鼠断头放血后，迅速取出心脏，放置冰水混合in后转换成以含胶原酶I(0.5g/L)和牛血清白蛋白(1g/L)的in后将心室肌剪下，放