4电泳的概念.pptVIP

表3-4 不同琼脂糖凝胶浓度与分离DNA大小范围的关系 琼脂糖凝胶浓度(%) 线性DNA分子的有效分离范围(kb) 0.3 5—60 0.6 1—20 0.7 0.8—10 0.9 0.5—7 1.2 0.4—6 1.5 0.2—4 2.0 0.1—3 ? * 7.3新型凝胶介质 虽然聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶是目前最常用的两种支持介质，但是它们还存在一定的局限性，如聚丙烯酰胺凝胶聚焦的重复性较差，琼脂糖凝胶容易断裂等。近年来人们正在寻求新型的电泳材料。 第一类：丙烯酰胺单体替代物如poly-N-acryloyl-tris(NAT)、N-acryloyl sugars、N-acryloylaminoethoxye thanol(AAEE)等。这类N-取代聚丙烯酰胺材料具有以下优点： * 具有较强的水解稳定性，在较广的pH范围内稳定，能在pH2—13环境中进行电泳，适合作为酸碱性pH范围等电聚焦的支持介质； 具有高度的亲水性和大孔性，适合大相对分子质量物质的分离；凝胶的机械强度高。 * 第二类：聚丙烯酰胺—琼脂糖混合物(Polyacrylamide-agarose mixture)、聚丙烯酰胺—琼脂糖的衍生物混合物(polyacrylamide-allylglycidyl mixture)，这类电泳支持介质具有以下优点： 具有聚丙烯酰胺分辨率高和琼