‘中秋酥脆枣’组培技术研究.docVIP

　　‘中秋酥脆枣’组培技术研究 陶爱群 （湖南环境生物职业技术学院园林系，湖南衡阳421005） 摘要：为建立‘中秋酥脆枣’的组培快繁体系，对外植体消毒时间长短和种类选择、不定芽诱导、不定芽增殖、不定根诱导进行研究。结果表明：最佳外植体是水培枝枣头；该外植体用升汞处理5 min 后，接种于MS（改良）+ 6-BA 2.5 mg/L+ NAA 0.15 mg/L，不定芽诱导率达94%；最适增殖培养基为MS（改良）+6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L，平均不定芽达6.5；1/2MS（改良）+ NAA 0.15 mg/L 为最适生根培养基，不定芽平均生根3.6 个。 .jyqkail：[email#160;protected]。 收稿日期：2014-05-14，修回日期：2014-11-05。 0 引言 ‘中秋酥脆枣’是祁东糖枣的一个芽变品种，适应南方高温高湿气候，抗性强适应性广，早果丰产性好，品质优良，成熟期恰逢中秋、国庆，填补了鲜枣的市场空白，经济价值极高[1]。‘中秋酥脆枣’已在湖南、江西、广西、云南、重庆等多个南方省市推广种植，但其育苗采用嫁接方式，所需的繁殖材料多，且从砧木苗的培育至嫁接苗出圃，至少需要3 年以上，耗时长，管理较为困难，使‘中秋酥脆枣’在南方的广泛推广种植受到了影响。早在1994 年王玉国等[2]就对‘骏枣’组织与快繁技术进行了研究。迄今为止已有‘骏枣’[2]、‘吕西枣’[3]、‘桐柏大枣’[4]等多个枣树品种成功再生出完整植株，‘金丝小枣’[5]、‘苹果枣’[6]、‘台湾印度枣’[7]、‘毛叶枣’[8]等品种建立了组培快繁体系。枣类组培外植体选用了休眠枝、水培芽[5]、带腋芽茎段[7-8]、叶片、一年生枝、二次枝、枣头芽[6]，培养基主要为MS、S、H、 等[5,9]，启动培养选用不同浓度的IBA、IAA、NAA、BA、KT[5,8]等，继植物生长调节剂影响枣的代增殖过程[5,8,10]，亦有研究发现NG在‘临泽小枣’继代过程中可代替植物生长调节剂起作用[11]。生根则多采用不同浓度IBA、NAA[5-7]。虽对枣树组培快繁有较多的研究，但所有的研究对象均为北方枣品种，对南方广泛栽种的‘中秋酥脆枣’组培技术研究目前没有报导。为了能在短期内大量生产‘中秋酥脆枣’苗，解决苗木生产受季节、场地限制的问题，笔者拟建立‘中秋酥脆枣’组织培养技术体系，为探索其苗木生产的新途径奠定基础。 1 材料与方法 1.1 试验时间、地点 研究田间试验于2010 年在祁东县新丰果业公司进行，室内试验在2011 年5 月至2013 年10 月在湖南环境生物学院组培基地进行。 1.2 外植体筛选与消毒 1.2.1 1 年生枝条水培枝试材采自祁东新丰果业公司采穗圃。于2010 年12 月选取生长健壮的1 年生枝条放置于气调库中贮藏或埋于湿砂中至翌年4 月枣芽萌发前取出，放入纯净水置于人工气候室中培养，每3 天换水1 次。采下长1 cm的枣头、枣股，用洗衣粉水浸泡0.5 h，无菌水冲洗后转入超净工作台，用70%的酒精浸泡30 s，分别用0.1%升汞溶液浸泡1、2、3、4、5 min 后无菌水冲洗4~5 遍，接种于不含生长调节剂、蔗糖含量为3%的培养基上，每种材料不同消毒时间均接种40个，20天后统计材料的污染率。 1.2.2 野外1 年生枝条2011 年5 月在祁东新丰果业公司采穗圃选取生长健壮的当年生枣头、枣股、二次枝，用流水冲洗后1 h 后，再用无菌水浸泡0.5 h。后带入超净工作台上，用70%的酒精浸泡30 s，分别用0.1%升汞溶液2、4、6、8、10 min 后无菌水冲洗4~5 遍，接种于不含生长调节剂、蔗糖含量为3%的培养基上，接种数量同水培枝，20天后统计污染率。 1.2.3 最优外植体的筛选将1 年生水培枝新萌发的枣头、枣股，1 年生枣头、枣股及二次枝按最优消毒方式处理后，每种外植体选50 个接种在改良MS+ NAA1.00 mg/L的培养基上，30天后统计褐化率和启动率。 1.3 不定芽诱导 1 年生水培枝上选取生长健壮的枣头（长约1 cm）作为外植体，Y1~Y5 培养基以改良MS[1-2]培养基为基本培养基，生长素和细胞分裂素浓度如表1，每种培养基接种10 瓶，每瓶5 个，30 天后统计启动率，60 天后统计不定芽产生率。 1.4 增殖培养 初代培养出的不定芽，接种于6-BA和NAA浓度（见表1 Z1~Z5）的培养基进行增殖培养。每种培养基接种10 瓶，每瓶5 个，30 天后统计不定芽的再生频率和生长状况。 1.5 不定梢生根 选取长2~3