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水稻农杆菌转化方法
方法1
NB基本培养基(右边的为N6,大量相同,加glycine甘氨酸2 mg/L)
KNO3 2830 mg/L
(NH4)2SO4 463 mg/L
KH2PO4 400 mg/L
MgSO4.7H2O 185 mg/L
CaCl2.2H2O 166 mg/L
FeSO4.7H2O 27.8mg/L 5.6
Na2EDTA 37. 5 mg/L 7.5
MnSO4.4H2O 10 mg/L 27.8
H3BO3 3 mg/L 1.6
ZnSO4.7H2O 2 mg/L 1.5
Na2MoO4.2H2O 0.25 mg/L 0.25
CuSO4.5H2O 0.025 mg/L 0.025
CoCl2.6H2O 0.025 mg/L 0.025
KI 0.75 mg/L 0.8
盐酸硫胺素 thiamine CHL VB1 10 mg/L 0.1
盐酸吡哆醇 pyridoxine-CHL VB6 1 mg/L 0.5
烟酸 nicotinic acid 1 mg/L 0.5
肌醇 myo-inositol 100 mg/L 100
水解酪蛋白 300 mg/L
谷氨酰胺 500 mg/L
脯氨酸 500 mg/L
蔗糖 30,000 mg/L
PHytagel 2.6 mg/L
pH 5.8
?Basic培养基
B N6（大量） 50ml （20倍）
A Ms-Fe盐 10-20ml（100倍） CH 0.3g/L
S B5 macro 10ml （100倍） phytogel 4g/L或 agar 8g/L
I B5 vita 10ml （100倍） sucrose 30g/L
C proline 0.5g/L glutamine 0.5g/L
?N6 (大量梗稻种子) 终浓度 母液(20倍) 终浓度 母液(20倍)
培 KNO3 2830mg/L 56.6g/L MgSO4.7H2O 185 mg/L 3.7 g/L
养 (NH4)2SO4 463 mg/L 9.26 g/L CaCl2.2H2O 166 mg/L 3.32 g/L
基 KH2PO4 400 mg/L 8.00 g/L
制备 1 KNO3, (NH4)2SO4, KH2PO4同时倒入烧杯,加水搅拌, 使之完全溶解.
2 MgSO4.7H2O 先溶于加了100ML水的烧杯中溶解后再缓慢倒入1中,边倒边搅, 不能有沉淀.
3 CaCl2.2H2O的配制同MgSO4.7H2O
4 配好后放于棕色瓶4℃保存
?MS(大量籼稻种子) 终浓度 母液(20倍) 终浓度 母液(20倍)
培KNO3 190
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