紫外分光光度计使用方法.docVIP

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紫外分光光度计使用方法

仪器名称:紫外/可见分光光度计系统 使用方法:开机步骤 1 开光谱仪电源 2 开计算机电源 3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作。 2 方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法。 1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描。 2)时间驱动(TIME DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学。 3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值。 4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度。 2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名。 2.2 方法的设定 2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动 各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示。 2.2.2 浓度 浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。 3 工具条 3.1 SETUP 当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态。 3.2 AUTOZERO 用鼠标指按此键,分光光度计即进行调零(在光谱扫描中则进行基线校正)。 3.3 START 用鼠标指按此键,光度计即开始运行所设定的方法。 4 方法运行 4.1 扫描,时间驱动,波长编程 方法选好后,先放入参比溶液,按AUTOZERO键,进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品,按START,分光光度计即开始进行,同时屏幕上出现图形窗口,将结果显示出来。 4.2 浓度 4.2.1制订标准曲线 1 方法选好后,确认各项数据正确,特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit mode”。再放入参比溶液,按AUTOZERO键自动校零或背景校正。 2 按setup,待该图标消失后,再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液,每次都按提示进行操作。 3 标准色列测定 完毕后,屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线,并标出各项标准管的位置,屏幕下方还有一条Concentration mode的对话框,可以用来修改拟合的曲线类型(按 change calbration),或修改标准溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加标准溶液管数(add)。如过已经满意,则按analyse sample键,进入样品测定窗口。 4 标准曲线有关的各项数据,均在calibresultwindow中,可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据,标准曲线的回程方程式,相关系数,残差。 4.2.2样品浓度测定 4.2.2.1刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时 1 只需在concentration mode对话框按analyse sample键,进入样品测定窗口。 2 按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。 3 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。 4.2.2.2利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时 4.2.2.2.1 调出所测定样品的浓度方法文件,首先调出refs页,将原设edit mode选项取消,改设左上角的using exiting calibration。重新将方法存盘,则今后再调用时即不需再作修改。 4.2.2.2.2 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。 4.2.2.2.3 按工具条中setup键,将主机设到该方法所设定的条件。 4.2.2.2.4 将参比溶液放入比色室,按autozero键做背景校零。 4.2.2.2.5 按start键,按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。 4.2.2.2.6 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中相应位置。

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