八月札水提物对H22荷瘤鼠血清总抗氧化能力-超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量影响.docVIP

八月札水提物对H22荷瘤鼠血清总抗氧化能力\超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量影响[摘要]目的：研究八月札水提取物对H22肝癌荷瘤小鼠血清中T－AOC(血清总抗氧化能力)、SOD(超氧化物歧化酶)活性和MDA(丙二醛)含量的影响。方法将4只小鼠接种鼠肝癌H22细胞株制成腹水型瘤源鼠，7d后处死瘤源鼠稀释其腹水并接种于实验小鼠制成荷瘤鼠，将H22荷瘤鼠随机分成6组，每组12只，雌雄各半；接种次日，随即各实验组灌胃中药、凉开水连续给药12d，隔日称体重1次，停药次日处死动物并进行指标检测。结果药物大剂量＋环磷酰胺组肿瘤抑制率最高为65.05％，该组SOD含量(237.12±22.18)μ/ml，T－AOC含量(8.20±1.76)μ/ml，MDA含量(4.72±1.99)μ/ml。结论：八月札水提物能够明显抑制荷瘤鼠体内肿瘤生长，具体机制可能与有效改善小鼠体内氧自由基代谢有关。 [关键词]八月札；超氧化物歧化酶；丙二醛；血清总抗氧化能力；H22荷瘤鼠 [中图分类号]R965 [文献标识码]A [文章编号]1672－4208(2010)11－0004－02 八月札是一种野生佳果，无不良反应，为木通科木通属植物木通、三叶木通、白木通的成熟果实的总称，分布在我国南部、长江流域和西北地区。在“抗癌中药大辞典”中记录其对消化系统肿瘤和乳腺癌有较好的治疗作用。但是在国内对其研究还仅限于化学成分的分析及鉴定，抗肿瘤作用的研究报道较少。笔者于2009年7月－2010年3月进行了八月札水提物对H22肝癌荷瘤小鼠保护作用的实验研究，通过计算肿瘤抑制率和检测血清中T－AOC、SOD的活性和NDA含量，评价八月札水提物对荷瘤小鼠的治疗作用及其抗氧化能力。 1、材料与方法 1.1　材料 1.1.1　实验动物　健康昆明种小鼠72只，5周，18－22 g，雌雄各半，由佳木斯大学实验动物中心提供，将以上小鼠分笼喂养，正常饮食，定期紫外线消毒，清洁卫生。 1.1.2　实验试剂　八月札购自佳木斯大学中医药研究所，SOD、T－AOC和MDA试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 1.1.3　实验仪器　旋转蒸发仪、超声仪、光学显微镜(欧林巴斯公司生产)、电子天平(美国Satems公司生产)、722光栅分光光度仪。 1.2　方法 1.2.1　实验设计及分组　将小鼠随机分成6组，每组12只，雌雄各半；分为阴性对照组，阳性对照组(环磷酰胺)，八月札水提物大剂量组、小剂量组，八月札水提物大剂量(小剂量)加环磷酰胺组。 1.2.2　肿瘤接种　将4只小鼠腹腔注射鼠肝癌H22细胞株，每只鼠0.2ml，制造腹水型瘤源鼠，接种7 d后的瘤源性小鼠，固定在手术板上，酒精消毒腹部局部皮肤，用无菌注射器抽取乳白色腹水，置于无菌器皿内，从中取0.1 ml腹水，加0.9 ml生理盐水，摇匀，用滴管从中取1滴置于小瓶内，再用滴管滴加9滴台盼蓝液，在显微镜下用细胞计数板计数后，用生理盐水稀释腹水，调整细胞密度为l×107/ml，按0.2 ml/只接种于经酒精消毒后的小鼠的左前腋下，整个实验操作在1 h内完成，术后观察动物行为有无异常。所有小鼠经接种肿瘤细胞后，均常规饮食。 1.2.3　八月札水提取物的制备　中药适当粉碎后加蒸馏水(1:10)，浸泡3 h，煮沸提取60 min，收集药液，药渣再用水煮30 min，合并2次药液，经50℃减压浓缩，真空干燥箱放置干燥，得八月札水粗提物固体干粉，临用前蒸馏水稀释为含生药浓度。 1.2.4　接种实体瘤动物的处理　接种次日，随即各实验组灌胃中药、凉开水连续给药12 d，隔日称体重1次，停药次日处死动物。 1.2.5　数据的统计学处理　实验结果用(x±s)表示，采用单因素方差分析，组间两两比较采用q检验。 1.2.6　小鼠血清中SOD、MDA和T－AOC水平的测定采用比色法进行测定。 1.2.7　肿瘤抑制率的计算　肿瘤抑制率＝(1－给药组平均瘤重/对照组平均瘤重)×100％。 2、结　果 2.1　肿瘤抑制率的计算　通过计算肿瘤抑制率发现，各用药组对荷瘤鼠体内肿瘤生长均有不同程度的抑制作用，其中八月札和环磷酰胺联合用药组肿瘤抑制率明显高于其他用药组；提示八月札水提物能够显著抑制荷瘤鼠体内肿瘤生长，并可能和环磷酰胺之间存在协同作用。详见表1。 2.2　八月札水提物对小鼠血清中SOD、MDA和T－AOC水平的测定通过试验获得各实验组SOD、T－AOC活性和MDA含量的检测结果表明，阳性对照组、药物组、联合用药组同阴性对照组比较均能够明显提高小鼠血清中SOD和T－AOC活性，提高清除自由基、抗氧化应激和维持体内环境活性氧的动态平衡能力；并显著降低MDA水平，