微波辅助提取葛根多糖工艺探究.doc

微波辅助提取葛根多糖工艺探究摘 要:目的:尝试使用微波辅助法提取葛根可溶性多糖(简称葛根多糖),并优化其提取工艺#65377;方法:采用单因素试验和正交试验,以多糖的提取率为评价指标,对影响葛根多糖提取工艺的因素进行研究#65377;结果:优化后的较佳工艺条件为:浸取时间25min#65380;微波功率800W#65380;浸取温度100℃#65380;料液比l:20#65377;结论:微波辅助提取葛根多糖是一种高效和节能的方法,优化后的工艺条件,葛根多糖的提取率为57.74%#65377; 关键词:葛根 多糖 微波提取 单因素试验 正交试验 葛根Pueraria Lobata （Willd.） Ohwi别名鹿藿#65380;鸡齐,是豆科植物葛的块根,富含多糖,异黄酮类,香豆索和皂苷,具有解肌退热#65380;生津透疹#65380;升阳止泄等功效[1]#65377;我国葛根资源极为丰富,主产南方,除新疆#65380;西藏外,大部分省区均有分布[2]#65377;葛根的主要药用组分为葛根黄酮和葛根多糖[3]#65377;多糖类化合物是一种免疫调节剂,能激活免疫细胞,提高机体的免疫功能,而对正常细胞无毒副作用,可用于治疗肿瘤#65380;艾滋病等#65377;鉴于多糖在临床方面的广泛用途,本文着重研究了葛根多糖的提取工艺#65377;微波辅助提取技术是近年发展起来的一种新型提取方法,具有设备简单#65380;适用范围广#65380;能量损失小#65380;提取速度快等优点[4]#65377;本文尝试采用微波辅助提取这一新型工艺对葛根的#65380;可溶性多糖进行提取,通过单因素和正交试验,优化提取工艺,为葛根药材的应用提供参考#65377; 1 仪器与试药 XH-100A型祥鹄电脑微波催化/合成萃取仪;岛津UV-2450紫外可见分光光度计#65377;葛根购于三九药房,经湖北中药研究院王克勤研究员鉴定为豆科葛属植物野葛Pueraria Lobata （Willd.） Ohwi的干燥根;实验中所使用的葡萄糖#65380;苯酚#65380;浓硫酸#65380;石油醚（60～90℃）#65380;乙醇均为分析纯,水为纯化水#65377; 2 分析与实验方法 2.1 分析方法 2.1.1 高纯苯酚试剂的制备 取苯酚200.0g,加入铝片0.5g和碳酸氢钠0.1g,蒸馏收集182℃馏分,称取此馏分100.0g,加400.0mL纯化水使其溶解,制得20.0%高纯苯酚溶液,置于棕色磨口瓶中冰箱4℃冷藏储存#65377;取上述高纯苯酚溶液30.0g,加70.0mL纯化水,制得100.0g浓度为6.0%的高纯苯酚试剂备用#65377; 2.1.2 多糖含量的测定 实验采用苯酚-硫酸法[5]测定葛根多糖的含量:准确吸取待测溶液2.0mL,置于具塞试管中,加入6.0%苯酚试剂1.0mL,迅速加入98%浓硫酸5mL,摇匀,静置,待试管自然冷却后,沸水浴中放置15min,取出冷却至室温#65377;同时精确吸取纯化水2.0mL,同法操作,作空白对照,于特征吸收波长测定其吸光度#65377; 2.1.3 对照品溶液的配制 精密称取经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品500mg,置于500mL容量瓶中,纯化水定容,配成浓度为1.000mg/mL的标准溶液#65377;精确吸取葡萄糖标准溶液1.0mL#65380;2.0mL#65380;3.0mL#65380;4.0mL#65380;5.0mL#65380;6.0mL#65380;7.0mL#65380;8.0mL分别置于50mL容量瓶中,纯化水定容,得系列标准品溶液#65377; 2.1.4 特征吸收波长的确定 准确吸取2.0mL浓度为0.16mg/mL的标准溶液,按2.1.2所述方法操作,用紫外可见分光光度计在250nm-800nm之间扫描,如图1所示,结果表明葡萄糖溶液在波长为490nm时有稳定的特征吸收峰,与文献[6]所述一致#65377; 2.1.5 标准曲线的绘制 于波长490nm处准确测量上述系列标准品溶液的吸光度,以葡萄糖浓度(C)对吸光度(A)作回归处理,得回归方程:C=0.06711A+0.00092（R=0.9999）,说明葡萄糖溶液在浓度为0.02～0.16mg/mL之间有良好的线性关系#65377; 2.2 实验方法 2.2.1 葛根原料的前期处理 称取干燥至恒重的葛根颗粒100.0g,先经石油醚回流脱脂提取,抽滤#65377;药渣经干燥后再用80%乙醇回流提取,除去单糖#65380;低聚糖和黄酮,抽滤,二次药渣经干燥后备用#65377; 2.2.2 葛根多糖的提取与精制 取一定量葛根,加纯化水回流提取两