高效液相色谱法测定柴黄软胶囊中黄芩苷含量.docVIP

高效液相色谱法测定柴黄软胶囊中黄芩苷含量【摘要】 目的 建立柴黄软胶囊中黄芩苷（Baicalin）HPLC含量测定方法。方法 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0．03％磷酸溶液（50∶50）为流动相；检测波长278 nm， 测定柴黄软胶囊中黄芩苷的含量；供试品溶液制备用甲醇超声提取。结果 线性范围0．13～1．17 μg，γ=0．999 8，线形关系良好；回收率为99．4%，RSD=0．99%。结论 本法专属性强，简便快速，精密度良好。 【关键词】 黄芩苷；含量测定；HPLC；柴黄软胶囊 柴黄软胶囊系由柴胡、黄芩、甘草等多味中药组成的复方中药软胶囊制剂，具有清热解毒、消炎的功效。为了更有效的控制该制剂的质量，现用HPLC法测定柴黄软胶囊中黄芩苷（Baicalin）的含量，对其操作方法，重现性、准确性、稳定性做以下实验，探求控制该产品质量的方法。 1 仪器与试药 Agilent高效液相色谱仪，黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号：715- 200111 供含量测定用），试剂均为分析纯 。 2 实验方法与结果 2．1 色谱条件 色谱柱为Diamonsil C?18 5 μ（4．6×250 mm）；流速：1．0 ml/min；柱温：30℃；流动相：甲醇-0．03%磷酸溶液（50∶50）；检测波长：278 nm。 2．2 对照品溶液与供试品溶液制备 ①对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1 ml含0．06 mg的溶液，即得;②供试品溶液的制备：取本品10粒，除去软胶囊，精密称定，研细，精密称取0．5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml，称定重量，超声处理（功率250 W，频率25 kHz）30 min，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2．3 空白实验 按样品的含量测定方法对不含黄芩的阴性样品同法处理，依法测定，结果在HPLC图谱上，黄芩苷峰相应位置上无干扰。 2．4 方法学考察 2．4．1 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液（0．065 16 mg/ml）2．0、6．0、10．0、14．0、18．0 μl，注入液相色谱仪，按上述条件测定，以峰面积为纵坐标，进样量（μg）为横坐标，得回归方程Y=1 764．91X+7．2745，线性范围0．13～1．17 μg，γ=0．9998。线形关系良好。 2．4．2 精密度实验 精密吸取0．065 16 mg/ml的黄芩苷对照品溶液10 μl，连续进样5次，测定峰面积,结果RSD=1．07%，表明仪器精密度良好。 2．4．3 重现性实验 依法对同一批号的样品（批号5）进行5次独立测定，计算结果黄芩苷的含量及相对标准偏差,结果黄芩苷含量的平均值为2．49 mg/片，RSD为1．16%，结果表明本法的重现性好。 2．4．4 稳定性实验 取同一供试品溶液（批号5 ），依法分别于0、4、8、12、24 h测定黄芩苷峰面积，计算相对标准偏差,结果RSD为1．60%，表明供试品溶液在24 h内稳定。 2．4．5 回收率实验 取已知含量的样品（批号：5 ，含量12．412 8 mg/g）0．25 g，精密称定，精密加入黄芩苷对照品3．051 2 mg，依法测定，计算回收率,结果平均回收率为99．4%，RSD=0．99%，表明本法准确可行。 2．4．6 样品测定 依法测定厂家提供样品5批（见表1）。 3 小结 柴黄软胶囊是一种多组分的中药复方软胶囊制剂，在本实验条件下其他成分对黄芩甙的测定无干扰；本法采用甲醇溶解使大部分杂质沉淀，避免了色谱柱的污染。 “本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文”。 1