传染性脾肾坏死病毒VP23R、VP48R及VP92R的功能研究.pdfVIP

of andVP92R Functions VP23R，VP48R froml-romInfectiouslnlectiousandnd genes spleenpleenkidney neCrOSISVIrUS 博士后：徐晓鹏 流动站：海洋科学 二级学科：海洋生物学 合作导师：林浩然院士教授 中山大学生命科学学院广州510275 二零一零年七月 l l l I[Illl l Ul ILllI IUl Y1779287 鱼类。器官出血、腹 水增多等脉管系统病变，是导致鱼类死亡的主要原因。VP23R和VP48R是肿大细胞 病毒属病毒所共有的基因，研究表明，VP23R具有层粘连蛋白同源区，VP48R隶属 VEGF家族基因，这两个基因的功能都与脉管系统有关。本文对VP23R和VP48R在 ISKNV感染过程中的功能进行研究。VP23R的292—576与鳜的lamininY1IIl2—6 免疫荧光证实VP23R定位于被感染细胞的外膜上，但并不是病毒的囊膜蛋白。免 和nidogen在ISKNV感染肿大细胞外形成一个类基底膜结构为内皮细胞的贴附提 供位点；免疫组化表明肿大细胞外贴附的内皮细胞为淋巴管内皮细胞特异性标志 的功能与细胞的传代有关。为了研究VP48R基因的功能，我们构建了缺失VP48R 基因的ISKNV突变株，VP48R缺失的病毒对活体鳜组织细胞的感染率大幅度降低， 免疫组化证实ISKNV感染的细胞类型为淋巴管内皮细胞，表明VP48R的功能是作 为淋巴管内皮细胞生长因子促进ISKNV的靶细胞——淋巴管内皮细胞的增殖为病 毒的侵染提供更多的宿主。我们还研究了ISKNV线粒体定位蛋白VP92R的功能， 先前的研究表明，VP92R可以促进黑色素瘤的恶变，本研究通过蛋白双向电泳技术， 对稳定表达VP92R基因的B16FO黑色素瘤细胞的全细胞及线粒体蛋白组进行了研 究，证明VP92R的促肿瘤恶变作用可能与P53抑癌基因信号通道的抑制有关。 shownthatVP23Rissimilartothelaminin VP48R hasbeen belongs study protein，and VEGF functionsareallrelatedtothevessel studies tothe family．Their system．This focusthefunctionsofVP23RandVP48R ISKNVinfection．TheVP23R on during containsa tothe1112-6 the protein region44．5％homologousdomains．coveringhigh ofthemandarinfishlaminin 1 chain． nidogen—bindingregion