2--BFI于不同时间窗给药对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用.pdfVIP

温州医学院硕士论文 2-BF I于不同时间窗给药对脑缺血／再灌注损伤的神经保护 作用 中文摘要 目的：观察在脑缺血／再灌注后不同的时间点应用2一(2一苯并呋喃基)-2-咪唑 ine，2-BFI]的保护作用并初步确定有效用 啉[2一(2-benzofu—ranyl)一2一imidazol 药时间窗。 Cerebral 2809，采用线栓法阻塞大脑中动脉(MiddleArtery，MCA)，于术后120 分钟拔出线栓，建立SD大鼠脑缺血／再灌注模型。将大鼠随机分为①假手术组： 颈部血管分离但是不插入线栓，于相应时间点股静脉注射与用药组药物相同体积 的生理盐水(NS)：②模型对照组：挑选符合条件的脑缺血／再灌注模型，于相应 时间点股静脉注射与用药组药物相同体积的生理盐水(NS)；③模型用药组：用 药组分为脑缺血／再灌注后0h、1h、3h、5h、7h、9h用药组，分别于相应时间点 股静脉注射2一BFI(3mg／kg)。于用药22h后进行Zea longa5分制神经功能评分并断 tetrazolium 头取脑，通过2、3、5、一三苯基氯化四氮唑(Triphenyl transferase——mediateddUTP——biotinnickend deoxynucleotidyl labeling assay：TUNELassay)、免疫组化等方法比较于脑缺血／再灌注后的不同时间点用 药后，药物对神经功能、梗死灶体积、脑组织病理学、神经元的超微结构、凋亡 细胞及Bcl一2、Bax蛋白表达的影响。 结果： 1．神经功能评分 模型对照组神经功能损伤最严重，假手术组神经功能正常，其余各模型用药 组均有不同程度的神经功能缺损，其中脑缺血／再灌注后0h、1h、3h用药组神经 功能缺损程度最轻，与模型对照组相比在统计学上有显著差异，PO．01，缺血／ 再灌注后5h用药组与模型组相比也有统计学差异，PO．05。 2．脑梗死灶体积比较 假手术组脑组织无梗死灶，模型对照组梗死灶较大，2BFI各时间窗用药组脑 组织可见体积不等的梗死灶，脑缺血／再灌注后0h、1h、3h、5h、7h、9h静脉注 射2BFI，梗死灶体积有所减小，且用药时间越早，效果越明显。与模型组相比， 脑缺血／再灌注后0h、lh、3h、5h用药，梗死灶体积明显减小。 温州医学院硕士论文 3．HE染色 假手术组脑皮质神经细胞排列规则有序，神经元细胞核形态规整，呈圆形，位 于胞体中央，着色较浅，核膜清晰，核仁明显；细胞内的尼氏体呈颗粒状，无变 性水肿，无坏死。模型组的梗死灶核心区神经元细胞核固缩，核仁消失，胞浆疏 松，染色变浅，神经细胞水肿、变性、坏死，间质水肿，神经细胞密度减少。脑 缺血／再灌注后Oh、1h、3h、5h用药组也可见梗死区神经元水肿、变性、坏死， 核固缩，但较模型组轻。 4．电镜 假手术组神经细胞排列规则、紧密，细胞质及细胞核电子密度均匀，核膜清 晰，核仁完整，细胞核内的染色质分布均匀，胞质内的各种细胞器清晰可见，线 粒体结构完整；模型对照组、脑缺血／再灌注后3h、5h、7h、9h用药组缺血半暗 带可见神经元内的线粒体嵴紊乱、扩张、出现空泡，核膜毛糙不清、皱缩变厚： 脑缺血／再灌注后Oh和lh用药组，线粒体有轻微肿胀和扩张，神经元核膜略微 增厚。 5．凋亡细胞 假手术组偶见凋亡细胞，模型对照组可见大量凋亡细胞，脑缺血／再灌注后各 用药组与模型对照组相比凋亡细胞有显著性减少，PO．01。 6．脑组织Bc|_2蛋白的表达 假手术组偶见Bcl一2阳性细胞，模型组和再灌注后各用药组可见Bcl一2阳性细 胞表达，其中脑缺血／再灌注后9h用药组Bcl一2阳性细胞数量与模型对照组相比 性细胞数量与模型对照组相比显著性增多，PO．01。 7．脑组织Bax蛋白的表达 假手术组偶见Bax阳性