α1,3岩藻糖基转移酶--Ⅶ在人肝癌细胞凋亡及转移中的作用.pdfVIP

仅1，3岩藻糖基转移酶-VII在人肝癌细胞凋亡及转移中的作用 摘 要 伐l，3岩藻糖基转移酶．VII(简称FUT7)位于真核细胞的高尔基体中，是主 要催化唾液酸化的Lewis抗原SLe。岩藻糖基化的一个终末糖基转移酶，它使糖 链的加工终止，糖链结构不再改变。细胞凋亡是由多个基因严格控制的细胞程 序性死亡过程，它与许多临床疾病都密切相关，而细胞凋亡异常则与大多数恶 性肿瘤的发生和转移有关。肿瘤转移是一个非常复杂的过程，而它正是最终导 的一系列生物学效应。 我们的研究分为三个部分。首先，由于H202是一种常用的细胞凋亡诱导 剂，我们用终浓度为lmM的H202处理细胞，12小时后可以检测到明显的细胞 粒，用它转染772l细胞并筛选出稳定表达FUT7的细胞克隆。再用H202处理 细胞后发现过表达FUT7的细胞凋亡水平明显低于转染空载体的对照细胞，并 且过表达FUT7的细胞中p38MAPK的磷酸化水平也明显高于对照细胞，以上结 果说明FUT7在H202诱导的7721细胞凋亡过程中具有抗凋亡作用，并且这种 作用至少部分通过增强p38MAPK信号通路活性来实现。最后，由于本实验室前 达来促进细胞的侵袭能力，因此我们同时构建了突变体FUT7的真核表达质粒。 用它转染细胞后，我们发现，过表达突变体FUT7和过表达野生型FUT7一样可 并且这种作用不依赖于FUT7的岩藻糖基转移酶活性，而是通过某些未知的途 径上调Integrin亚基a5的表达来实现的。 综上所述，我们通过研究首次发现FUT7与H202诱导的772l细胞的凋亡 过程有关：l，H202处理诱导细胞凋亡的同时可以上调FUT7的表达水平；2， FUT7在H202诱导的细胞凋亡过程中起到抗凋亡的作用，并且这种抗凋亡作用 至少部分通过增强p38MAPK信号通路的活性而实现。另外，我们还发现FUT7 可以通过一种不依赖其岩藻糖基转移酶活性的方式增强7721细胞的体外侵袭能 力，这种作用可能部分通过上调Integrin亚基仪5的表达来实现。以上这些研究 结果拓展了我们对FUT7生物学功能的认识，也增加了我们对肿瘤细胞凋亡与 转移机制的理解。 Rolesof in andmetastasis al，3fucosyitransferase—VIIapoptosis ofhuman cells hepatocarcinoma Abstract localizesin a al，3fucosyltransferase-VII(FUT7)，which Golgiapparatus，is terminal in Lewis glycosyltransferase．Thefucosylationstepsialyl antigen X(SLex) was it．This leadstothe synthesiscatalyzedby enzyme terminationofglycan andthestructureof be processing the canno glycan longerprocessed．Cell apoptosis isa of cell is controlled processprogrammed