恩拉霉素生产菌株的遗传改造.PDFVIP

微生物学通报 Jan. 20, 2017, 44(1): 126−132 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.160068 研究报告 恩拉霉素生产菌株的遗传改造 1 1 1 2 2 1* 牟慧艳 刘扬 王应东 刘宝爱 魏建军 张会图 (1. 300457) (2. 300402) 摘 要：【目的】提高杀真菌素链霉菌发酵生产恩拉霉素的产量。【方法】利用定点突变技术，对 恩拉霉素生产菌株杀真菌素链霉菌F1 中影响细胞次级代谢及抗生素合成的核糖体S12 蛋白的编 码基因rpsL 进行改造，将第43 位的赖氨酸(Lys)分别替换为天冬酰胺(Asn)和精氨酸(Arg) ，并对 改造菌株L-M1(Asn43)和L-M2(Arg43)的生长特性、抗生素合成以及摇瓶发酵性能进行研究。【结 果】与野生型菌株相比，改造菌株的生长特性及生理生化特性均发生了明显的改变：产孢周期明 显缩短，野生型菌株在MS 培养基中，28 °C 下需要培养5−7 d 后才能产生孢子，而在相同条件 下，改造菌株3 d 后就能产生大量的孢子；恩拉霉素产量相对提高，摇瓶发酵条件下，改造菌株 L-M1(Asn43)和L-M2(Arg43)的恩拉霉素产量分别可达到1 334 U/mL 和1 456 U/mL，与野生型菌 株F1 相比分别提高了 11.9%和22.1% 。【结论】通过遗传改造，恩拉霉素的产量得到了提高，为 其他位点的遗传改造提供了可行性。 关键词：恩拉霉素，抗生素，抗真菌素链霉菌，遗传改造，核糖体S12 蛋白，定点突变 Genetic modification of an enramycin producing strain MOU Hui-Yan1 LIU Yang1 WANG Ying-Dong1 LIU Bao-Ai2 WEI Jian-Jun2 ZHANG Hui-Tu1* (1. Laboratory of Enzyme and Applied Microbiology, College of Biotechnology, Tianjin University of Science Technology, Tianjin 300457, China) (2. Tianjin Xinxing Veterinary Pharmaceutical Factory, Tianjin 300402, China) Abstract: [Objective] To enhance the production of enramycin by Streptomyces fungicidicus. [Methods] In this study, the ribosomal S12 protein encoding gene rpsL which affects the secondary metabolism and biosynthesis of antibiotics in enramycin producing strain of S. fungicidicus F1 was changed through the method of s