以直接斑点免疫结合测定法检测灰飞虱体内的水稻条纹-浙江大学学报.PDF

浙江大李李摧(农业与生命科学版)310):37^-40,2005 JournalofZhejiangUniversity(Agric.乙LifeSci.) 文章编号:1008-9209(2005)01-0037-04 以直接斑点免疫结合测定法检测灰飞虱体内的水稻条纹病毒 王贵珍 ，‘周益军’，周雪平’ (1.浙江大学生物技术研究所，浙江杭州 310029;2.江苏省农科院植保所，江苏南京210014) 摘 要:利用过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记了水稻条纹病毒(RSV)的3株单克隆抗体，3株酶标杭 体(HRP-3B9,HRP-2H2,HRP-2E5)的效价分别达到1:25600,1:1600,1:3200，直接ELISA方阵试验确 定HRP-3139的最佳工作浓度分别为1:5000.用HRP-3139在琦酸纤维素膜上采用直接和间接斑点免疫 结合试验(DIBA)对灰飞虱体内RSV进行了检测.结果表明，DIBA法可有效地用于检测灰飞虱的带毒 率，直接DIBA法比间接DIBA法灵敏度更高.故采用直接DIBA法对采自江苏10个县、市的灰飞虱带 毒率进行了检测. 关 键 词 :水稻条纹病毒;DIBA;酶标杭体;灰飞虱 中图分类号 :S432-4 文献标识码:A WANGGui-zhen，ZHOUYi-jun2，ZHOUXue-ping(1.InstituteofBiotechnology,ZhejiangUniversi- ty,Hangzhou310029,China;2.InstituteofPlantProtection，JiangsuAcademyofAgriculturalSci- ence，Nanjing210014,China) DetectionofRicestripevirusinLaodelphaxstriatellusbydirectdotimmunobindingassay.Journalof ZhejiangUniversity(Agric..LifeSci.)，2005,31(1):37-40 Abstract:Threehorseradishperoxidase-linkedmonoclonalantibodiesofRicestripevirus(RSV)，HRP- 3139，HRP-2H2andHRP-2E5，wereproducedbyNaIO,method.Thedilutedtimesofthethreeen- zyme-linkedantibodieswere125600,1，1600and1:3200,respectively.IndirectELISA，thesuitable dilutedtimesofHRP-3139was1:5000.Enzyme-linkedantibodyHRP-3139wasselectedtodetectRSVin LaodelphaxstriatellusFallenwithdirectdotimmunobindingassay(DIBA)andindirectDIBA,andthe detectionresultsshowedthatthedirectDIBAwasmoresensitivethanindirectDIBA.ThedirectDIBA wasthenusedtodetectthevirusinLaodelphaxstriatellusFallencollectedfrom10countiesinJiangsu province，China. Keywords:Ricestripevirus;DIBA;Enzyme-linkedantibodies;Laodelphaxstriatellus 收稿 日