实作测验一：分子生物学第一题酵素活性的测试时间4分钟第二题利用.PDF

Country:國家 實作測驗一：分子生物學 第一題 酵素活性的測試 時間45 分鐘 第二題 利用層析法及電泳法進行蛋白質分離 時間45 分鐘 45 分鐘後，將更換題目 選手必須按照指示更換題目 選手在測驗過程中不能互相討論也不能交換實驗材料 選手不能提前作答下一題 以下為第一題的提示 EXAMINATION # 1: Molecular Laboratory TASK 1 提示 選手必須於作答前詳閱題目內容 建議選手按照題目的配分分配作答時間 重要事項 所有的答案都必須寫在答案紙上 確認你三位數字的選手編號已劃記在答案紙上 使用所提供的鉛筆在答案卡上劃記圓圈 試題一 酵素活性之測定 指引 酒精去氫酶(ADH)可藉由下列反應，將酒精氧化為乙醛。 + + Ethanol + NAD acetaldehyde + NADH + H + 此反應中NAD 是重要的輔酶，此項反應速率可經由計算在波長340nm 中NADH 的濃度變 化推定出來。本測驗中你必須使用光度計來測定不同濃度酒精中此酵素之活性。 2 EXAMINATION # 1: Molecular Laboratory TASK 1 下列實驗材料及反應試劑將由大會提供 化學試劑 酒精溶液 ：0.5M, 0.25M, 0.125M, 0.063M + 緩衝劑2mM NAD in 80mM sodium phosphate buffer pH 7.4 containing 40mM KCl 酵素: 0.04 mg/ml alcohol dehydrogenase solution 酒精去氫酶溶液 裝置  光度計已設定在340 nm 波長  可調式微量滴管及tip: 1000L,100L and 20L, plus tips  收集tip 的黃色廢物桶  1ml 塑膠測試瓶  白色的攪拌塑膠條  計時器  油性筆  安全眼鏡  拋棄式手套  方格紙  尺  黑色筆  粉紅色紙卡用來招喚現場評分者的注意  答案卷、鉛筆及橡皮擦 實驗步驟 在1mL 的測試瓶中按照下表分別加入各項物質並注意要重複做此項實驗 3 EXAMINATION # 1: Molecular Laboratory TASK 1 Reaction No. Reaction Buffer Ethanol solution 1a 0.9 mL 0.1ml of 0.063M 1b 0.9 mL 0.1ml of 0.063M 2a 0.9 mL 0.1ml of 0.125M 2b 0.9 mL 0.1ml of 0.125M 3a 0.9 mL 0.1ml of 0.250M 3b 0.9 mL 0.1ml of 0.250M 4a 0.9 mL 0.1ml of 0.500M 4b 0.9 mL 0.1ml of 0.500M 每位參賽者將被提供一台光度計，有兩種型號的光度計，但使用結果會相同，且都已