正辛醇-水分配系数的测定试验.PPT

一、实验目的与内容 实验目的： 了解和掌握测定有机物KOW的原理和方法; 掌握气相色谱仪的使用原理和操作方法; 通过测定苯的KOW，深入了解其在评价有机物环境行为方面的重要性。 实验内容: 确定苯在正辛醇-水相中达到平衡的时间; 用摇瓶法测定苯的KOW ; 气相色谱测定水相中苯的含量。 二、实验原理 有机物KOW ：平衡状态下，化合物在正辛醇相和水相 中浓度的比值 正辛醇/水分配系数KOW 反映了有机物的疏水性或脂溶性大小 KOW越大，表明化合物越易溶于非极性介质中，越易被生物体细胞吸收 反映有机物在水中环境行为的重要参数 有机物的水溶解性，土壤沉积物吸附系数，生物富集因子及毒理学性质都与其KOW有关 摇瓶法: 取一定体积用水饱和的正辛醇制备的目标物溶液; 加入一定体积正辛醇饱和的蒸馏水; 恒温(20-25 ℃)，振荡平衡，离心，测定水相浓度; 计算分配系数KOW 产生柱法: 将一定体积目标物的水饱和的正辛醇溶液加入产生柱; 使用一定体积正辛醇饱和的蒸馏水循环通过恒温(25±0.5℃)的 产生柱中的正辛醇层; 连续测定五个水相浓度，至两相平衡，测定分配系数 高效液相色谱间接测定法 HPLC中，溶质的容量因子(k)与流动相组成(CB)的基本方程为: 三、实验材料与方法 仪器 恒温振荡器; 离心机; 气相色谱仪(氢火焰离子化检 测器);10 μL微量进样器; 5 mL和10mL具塞离心管干;各种规格移液管若干 仪器条件 柱温65 ℃，进样器120 ℃，检测器(FID) 140 ℃； 载气流速 30 mL/min，氢气流速 30 mL/min，空气流速 300 mL/min；进样量1 μL 试剂 溶剂的预饱和: 测定lgKOW前，将正辛醇和二次蒸馏水在振荡器上振荡24 h, 使其相互饱和，静置分层后，两相分离，分别保存备用 平衡时，有机相含有2.3 mol/L的水，水相中含有4.5×10-3 mol/L的正辛醇，备用 苯标准储备液: 配置80.0 mg/L苯的甲醇溶液，备用 样品溶液的制备: 准确移取80.0 mg/L苯的甲醇溶液 1 mL，用水饱和的正辛醇溶液定容至10 mL，备用 二硫化碳(经重蒸处理) 四 实验步骤 1、绘制标准曲线 取80.0 mg/L的苯的标准储备液1mL于100 mL容量瓶中，蒸馏水稀释至标线，摇匀; 分别取0，0.5，1.5，2.0，3.0，4.0，5.0 mL该溶液于5 mL离心管中，蒸馏水定容; 分别向离心管中加入100 μL CS2，充分振摇后离心机离心分离，自CS2层中移取1 μL进行色谱分析; 绘制浓度-峰面积校正曲线 2、平衡时间的测定 取样品溶液1 mL至10 mL具塞离心管中，加入正辛醇饱和的蒸馏水至刻度，盖紧塞子，置于振荡器上振荡 测定不同时间时水相中有机物的含量 水相中有机物浓度达到平衡时的时间即为有机物在正辛醇相和水相中达到平衡时的时间 3、摇瓶法测定 在浓度小于0.01 mol/L(正辛醇相)下进行分配系数测定，并至少要做两种不同浓度的实验，通常第一个浓度为第二个浓度的10倍。 振荡时间采用实验步骤2中所得的平衡时间。 取1.00 mL样品溶液于10 mL具塞离心管中，加入9.00 mL用正辛醇饱和的蒸馏水，恒温振荡器(25℃±0.5 ℃) 振荡，平衡后离心分离，用滴管小心吸去有机相；再离心，吸去残留有机相。 3、摇瓶法测定 取水样时，为避免正辛醇的污染，可利用带针头的玻璃注射器移取水样。 首先在注射器内吸入部分空气，当注射器通过正辛醇相时轻轻排出空气，在水相中吸取足够的水量时，迅速从溶液中抽出注射器，拆下针头后，即可获得无正辛醇污染的水。 从水相中取5 mL于离心管中，加入100 μL CS2充分震摇后，离心机破乳，取1 μL CS2层进行色谱分析，得苯的峰面积，由校正曲线计算出水相中苯的浓度。 平行测定三份，同时作空白实验。 五、结果与讨论 KOW: 正辛醇/水分配系数，常以lgKOW来表示； C: 达到平衡时有机化合物在正辛醇相中浓度 (μg/mL); CW: 达到平衡时有机化合物在水相中浓度 (μg/mL). 六、注意事项 化合物若是有机酸碱，应在水相中加入缓冲剂，使pH至少与未解离成分时的pKa值相差三个单位 ； 摇瓶法测定分配系数速度较快，但存在有机物易形成胶体颗粒、挥发、吸附等缺点 ； 摇瓶法仅限于lgKOW 5的化合物，对于疏水性强的化合物通常用产生柱法。 七、问题