壳寡糖分析检测的研究进展.pdfVIP

( 530022) 【摘 要】 【关键词】 【中图分类号】 【文献标识码】 【文章编号】 （一）引言 采用浸渍法显色。陈小娥，方旭波等通过系统研究，建立了 功能性低聚糖是由2～10个相同或不同的单糖以糖苷键 壳低聚糖的薄层-比色分析法，展开剂为正丁醇∶水∶乙酸∶ 聚合而成，具有糖类某些共同的特性，但不会被胃酸等降解， 氨水=20∶10∶10∶2；展开温度为25℃，为壳低聚糖的生产 不在小肠吸收直接到达大肠，具有促进人体双歧杆菌的增殖 和应用提供了一种经济、简便的分析方法。王晓燕，许牡丹 等生理功能，所以功能性低聚糖又被称为双歧因子。 等建立的壳低聚糖的薄层比色分析方法是展开剂为乙酸乙 壳寡糖（chitooligosaccharide，COS）又称低聚葡萄糖 酯∶无水乙醇∶水∶氨水= 5∶5∶4∶0.45，采用苯胺-二苯 胺，低聚氨基葡萄糖等，是功能性低聚糖的一种，是壳聚糖 胺-磷酸显色，点样量为2μg/μL，可分开单糖至低聚七糖各 降解后的产物，聚合度一般在2～10之间，是目前自然界中仅 组分，斑点圆形、清晰、无拖尾，分离效果好。 知的唯一的碱性寡糖，具有独特的生物活性，如抗菌抑菌； 薄层层析法虽然可以分析壳寡糖，价格低廉，但此方法 极强的吸湿保湿性；抑制肿瘤细胞（聚合度为6～8时活性最 操作时间长，只能进行微量生产，无法定量，薄层-比色法可 高）；诱发植物的诱导抗病性等，使其在食品、医药、化妆 用于壳寡糖常规检验。但是，要大规模地对壳寡糖分离分析 品和农业等方面有广阔的发展前景。不同分子量的壳寡糖， 还需要不断地寻求新的技术。 其生物活性差异很大。近年来，壳寡糖的功能研究取得了长 （ 2 ） 高 效 液 相 色 谱 (high performance liquid 足的进步，同时也对壳寡糖的分析测定提出了挑战。文章主 chromatography，HPLC) 要介绍了近10年内壳寡糖的分析测定方法的研究进展。 高效液相色谱法（HPLC）是定量分析低聚糖类及其他糖 （二）壳寡糖的分析测定方法研究进展 类最常用的方法，具有方便、快速、分离效果好、分辨率高、 1.比色法 重现性好和不破坏样品等优点，该方法必须有标准品作参照。 在初步分析壳寡糖时多采用比色法。邬建敏通过3,5-二 由于糖类物质在紫外光区间没有吸收，故无法使用紫外检测 硝基水杨酸(DNS)显色，确定了甲壳低聚糖平均聚合度及平均 器，早期多采用示差检测器来检测糖类物质，但是示差检测 相对分子质量。刘琳等利用分光光度法测定壳寡糖平均聚合 器无法进行梯度洗脱，所以检测的聚合度多在8以下，现在多 度，此方法经凝胶渗透色谱验证，能较为准确地判断壳寡糖 采用蒸发光散射检测器或电化学检测器（脉冲安培检测器）， 的平均聚合度。虽然比色法技术简单，对设备要求不高，成 分离柱常用氨基柱或阴离子交换柱。纪莹等通过HPLC法分析 本较低，但由于其准确性不高，因此有必要开发一种新的可 检测壳寡糖组分，用TSK-Gel Amide-80柱，示差检测器检测， 准确测定壳寡糖的分析方法。 流动相为乙腈∶水= 37∶63，pH为4.0，柱温为25℃，上样量 2.色谱法 1μL。李曙光等用Shodex NH2p-50 4E氨基柱，蒸发光散射检 （1）薄层色谱法 测器，使壳寡糖按照聚合度顺序依次被洗脱，检测到的壳寡 薄层色谱法是在纸层析法的基础上发展起来的，其分辨 糖的聚合度范围可达15糖。杨菊林等通过HPLC对不同脱乙酰 效率高，分离效果