离体快繁扯根菜总黄酮提取及抗菌活性研究.pdfVIP

第28 第4期 西华 师范大学学报 (自然科 学版 ) 2007年 12月 Vol. No-4 JournalofChinaWestNormalUniversity(NaturalSciences) Dec.2007 文章编号;1673-5072(2007)04-0274-04 离体快繁扯根菜总黄酮提取及抗菌活性研究 曹 桦 ，‘康超勇’，杨 军’,2 (1.西华师范大学生命科学学院，四川南充 637002;2.西华师范大学珍稀动植物研究所，四川南充 637002) 摘 要:采用4(34)正交实验方法、考察提取法与水浴提取法中乙醇浓度(A)，作用时间(B),温度/功率(C)，料 液比(D)4个因素对总黄酮提取量的影响，筛选最佳提取工艺;以此优化工艺分析不同种类及浓度的激素对再生苗 总黄酮含量的影响，分析提取物的不同菌体的抑制效果.结果表明超声波提取法优于水浴法，最佳参数:固液比为 1:10，在80%的乙醇中按50%的功率处理30min;源于添加0.5mg-LKt的MS培养基再生的扯根菜中的总黄酮 含量最大，为3.28%;提取物对金黄色葡萄球菌具有最大的抑制效果.添加激素的提取物对金黄色葡萄球菌和铜绿 假单胞菌的抑菌效果具有促进作用. 关键词:扯根菜;总黄酮;超声波提取;抗菌活性 中图分类号:Q819 文献标识码:A 扯根菜(PenthorumsedoidesPursh)俗名赶黄草，为虎耳草科(Saxfriagaceae)扯根菜属植物[1).其作为苗族 的传统中药之一，有保肝退黄，清热利尿的功效}.〔x)以扯根菜和金钱草为主要成分的肝苏颗粒，对乙型肝炎 及急性病毒性肝炎等均有显著的疗效3)〔，同时对肝损伤有明显的保护作用 ]〔‘.扯根菜的化学成分含有多种 黄酮类成分’〔〕，具有降低心肌耗氧量、软化血管、降低血糖血脂和清除人体中自由基等功效6)〔.本文在比较 水浴提取和超声波提取2种不同方法基础上，提取离体克隆的扯根菜幼苗中黄酮类化合物，分析不同激素及 浓度对黄酮含量的影响，并分析了黄酮对不同菌种的抑制效果. 1仪器与材料 1.1 材 料 取扯根菜的茎节段，灭菌后接种在含有不同浓度的BA和Kt的MS培养基中进行芽的增殖培养，1个月 后，切取嫩芽分别置于含有0.5mg/LIAA的MS生根培养基中生根，培养1月后取出放在(45土2)℃的烘箱 中烘干，提取实验在2d内完成. 1.2 培养基181 营养培养基，MH琼脂培养基;MH肉汤培养基. 1.3 供试菌种 金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌.供试菌种均由南充市中心医院细菌室提供. 供试菌种经传代纯培养后，取接种于(MH)肉汤培养基中，37℃培养6h，经血细胞计数板计数后，再用 MH肉汤稀释至含菌量为1护CFU/mL的菌悬液. 1.4 药品及仪器 芦丁标准品(批号购于国药集团化学试剂有限公司);其余试剂均为分析纯. GBCIV/VIS-916紫外可见分光光度计(澳大利亚);电子天平;恒温水浴锅(BS一65);超声波清洗器 (昆山)等. 收稿 日期:2007-07-11 基金项目:四川省青年科技基金资助项目(05ZQ026-017);四川省重点学科建设项目(SZD0420) 通讯作者:曹 桦(1981一)，女，四川江油人，西华师范大学生命科学学院硕士研究生，主要从事植物组织培养和次生代 谢产物活性研究. 万方数据 第28卷第4期 曹 桦，等:离体快繁扯根菜总黄酮提取及抗菌活性研究 275 2 方法与结果 2.1标准曲线的绘制[10] 取恒重的芦丁10mg，用80%乙醇定容至50mL(浓度0.2g/L)，吸取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.6, 2.0，分别加人5%NaN020.4mL，摇匀静置6min，加人10%AINO,0.4mL，摇匀静置6