系统生物学第二次试验.PPT

解剖镜下的线虫图片 思考题 1、画出在解剖镜下线虫的模式图 2、线虫的食物和培养方法有哪些 实验一 线虫培养 线虫是一种很小的蠕虫，其成体长仅1mm ，全身透明， 以细菌为食，居住在土壤中，全身共有不到1000个细胞，性别为雌雄同体或雄性。整个的生命周期仅3天。而且更为重要的一点是，它是唯一一个身体中的所有细胞能被逐个盘点并各归其类的生物。它已经成为现代发育生物学、遗传学和基因组学研究的重要模式材料. 2002年诺贝尔生物医学奖得主的研究材料即为秀丽线虫。 秀丽线虫 了解模式生物线虫 掌握线虫的基本培养方法 实验室培养线虫一般以细菌E.coli OP50为食物。 E.coli OP50是一种尿嘧啶营养缺陷型细菌， 在NGM培养基上生长将受到限制，这样将有利于线虫的观察和采集。 线虫一般以细菌为食，在实验室中使用细菌E.coli OP50饲养线虫。 E.coli OP50是一种尿嘧啶营养缺陷型细菌， 在NGM培养基上生长将受到限制，这样将有利于线虫的观察和采集。首先用固体LB培养基获得E.coli OP50的单菌株，然后接种到L Broth，在37°C下过夜培养。 LB 固体培养基： 培养E.coli OP50 10g细菌培养用胰蛋白胨 5g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 5g 琼脂 搅拌使其溶解，加水定容至1L，调节PH到7.5，高压蒸汽灭菌。 NGM 培养基: 线虫生长培养基 3gNacl 17g琼脂 2.5g蛋白胨 搅拌溶解，定容1L，高压蒸汽灭菌，在55°C的水中冷却 15min。 无菌操作加入下列试剂，混匀。 1ml 1M CaCl2 1ml胆固醇（5mg/ml溶于乙醇中） 1 ml 1M MgSO4 25ml 1M磷酸氢二钾缓冲溶液 分装到直径分别为5cm和10cm的培养皿，加到培养皿总体积的2/3。在使用前，将其装在带盖的塑料盒子中室温保存2-3天，使其干燥 无菌操作下，用吸管吸取约0.1ml E.coli OP50菌液，涂到10cm培养皿中央，使其均匀扩散。注意不要使菌液扩散到培养皿的壁上，否则线虫将沿壁爬出而死亡。另外，在菌液时要防止弄破培养基表面，加入菌液后最好不要马上移动培养皿，防止菌液流到培养皿壁。 让培养基在室温下静置过夜或则在37°C下培养8h（在加线虫前要使其冷却到室温）。接过种的培养基装在密封的容器中可保存2-3星期。 涂到10cm培养皿中央 用力过大会扎破固体培养基 制备NGM培养基 无菌操作下，用吸管吸取约0.1ml E.coli OP50菌液，涂到10cm培养皿中央，使其均匀扩散。 在解剖镜下用自制转移器将线虫转移到NGM培养基上 封存培养基，在20℃下培养三天 在解剖镜下用挑虫器将线虫转移到NGM培养基上 眉毛