复旦课件免疫学技术和应用.pdfVIP

免疫学技术的应用 免疫治疗 免疫预防 免疫诊断 免疫学诊断 一、抗原或抗体的检测 二、淋巴细胞的测定 三、免疫学检测方法的应用举例 一、抗原或抗体的检测-体液免疫检测 （一）抗原抗体反应 （1）特异性：一种抗原只能和由它刺激产生的抗体 相结合，不能跟与它无关的抗体发生反应。这种特性 是由抗原的决定簇及抗体可变的化学组成、空间立体 构型所决定的。 抗原与抗体两种分子间的 结构互补性与亲和性。 （2）可见性：当抗原抗体按适当比例结合，形 成肉眼可见的现象。 抗原一般都是多价的，而抗体（ IgG ）则是二价的，只 有二者比例适合时，抗原抗体才能结合得最充分，形成 的抗原抗体复合物最多，反应最明显，结果出现最快。 （3）敏感性 ：不仅可用于定性， 还可用于检测极微量的抗原抗体，其 灵敏程度大大超过当前应用的常规化 学方法。 （4）可逆性：抗原与抗体的结合虽具有稳定性，但由 于二者之间是非共价键结合，因此又是可逆的，在一定条 件下可解离，且解离后各自生物活性不变。 抗原抗体比例对反应现象的影响 （二）常见的体液免疫检测法： 凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应  细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形 成凝集现象，称为凝集反应。  1、直接凝集：将细菌或红细胞与相应的抗体直接 反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。  2、间接凝集：将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶 颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。 红细胞 乳胶颗粒 抗风湿分子 检测 O抗原为菌体抗原（多糖），刺激机体产生IgM H抗原为鞭毛抗原（肽链），刺激机体产生IgG 主要利用伤寒沙门菌的O,H抗原和副伤寒沙门 菌的A,B,C抗原检测病人血清中相应的抗体。 菌体抗原凝集试验—颗粒状沉淀 鞭毛抗原凝集试验—絮状沉淀 可溶性抗原（免疫球蛋白、细胞裂解物、组织浸液等） 与相应抗体结合，形成不溶性免疫复合物。沉淀反应可在 液体中进行，出现不透明的絮状沉淀。多在半固体琼脂凝胶 上进行，形成白色的沉淀。 免疫比浊法：快速简便。 用于血清IgG、IgA、IgM、 补体C3、C4含量测定 含抗体的凝胶 沉淀环  是将一定量已知抗体混于琼 脂凝胶中制琼脂板，在适当 位置打孔后将抗原加入孔中 扩散。抗原在扩散过程中与 凝胶中的抗体相遇，形成以 抗原孔为中心的沉淀环，环 的直径与抗原含量成正比相 关。本法常用于测定血清 IgG、IgM、IgA 和C 等的 3 含量。  位于凝胶不同小孔中的抗原和抗体，当两者相对扩散时，经 一定时间后，若两者相对应，会在琼脂小孔间、两者最恰当 的比例处形成白色沉淀线。观察沉淀线的位置、数量、形状 以及对比各沉淀线之间的关系，可对抗原或抗体进行定性分 析。  双向琼脂扩散常见孔型有三孔型、双孔型、双排孔型、梅花 孔型 ○ ○ ○ ○ ○ 三孔型 双孔型 ○ ○ ○ ○○○ ○ ○