6章 蛋白质分离纯化与表征-教学用.pptVIP

掌握蛋白质的酸碱性质。 掌握测定蛋白质相对分子质量的常用方法。 掌握蛋白质的胶体性质与蛋白质沉淀的方法和原理。 掌握蛋白质分离纯化的一般原则。 熟悉蛋白质分离纯化的常用方法。 掌握蛋白质含量测定与纯度鉴定的常用方法。 （三）沉降速度法测定相对分子质量 直接测定蛋白质Mr的方法：渗透压法、光散射法、沉降速度法、沉降平衡法和黏度法等，沉降速度法是经典的常用方法. 超速离心机最大转速: 60000～80 000r/min, 相当于位于距转轴中心10 cm处、单位质量(1g)分子所受到的离心力(离心场强度)为400 000 ×g～700 000 ×g. 沉降速度与蛋白质分子大小、密度和形状有关,且与溶剂密度和黏度有关. 单位离心场强度的沉降速度称为沉降系数, 用s(小写)表示: 从轴心到沉降界面的径向距离(cm) 时间 离心角速度(rad/s): 转速(r/min) ×2π/ 60 勾窃幸滞炽孺写髓味瘤垃藉淡惠鞘驭瘪炎荣酚鸯辅膏差固瘤怠鞋荫类箍愚6章 蛋白质的分离纯化和表征-教学用6章 蛋白质的分离纯化和表征-教学用 （三）沉降速度法测定相对分子质量 蛋白质、核酸、核糖体和病毒等的沉降系数：1 ×10-13~200 ×10-13秒范围. 把l0-13s 作为一个单位, 斯维得贝格单位(Svedberg unit)或称沉降系数单位, 用S(大写)表示. 例如人血红蛋白: 4.46S, 即