质量规格要求生产使用工艺和检验方法.DOC

4. 质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验方法或者相关情况说明 4.1 质量规格要求 名称：果胶裂解酶 Pectinlyase 来源：氏木霉Trichoderma reesei 供体：黑曲霉 Aspergillus niger 本产品符合GB1886.174-2016 《食品安全国家标准 食品添加剂 食品工业用酶制剂》的相关要求，标准文本见附件4。 4.2 果胶裂解酶酶活性的检验方法 该检验方法的方法学验证报告详见附件。 适用范围 此方法适用于检测果胶酶产品中果胶裂解酶的活性。 定义 在试验条件下，以每分钟在235nm波长下增加0.01为1个果胶裂解酶活性单位，通常用PTF/mg来表示。 试剂 本方法中所用水为去离子水、超纯水；所用试剂在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂。 柠檬酸磷酸盐缓冲溶液（pH=5.8） 称取35.6g磷酸氢二钠二水合物(Na2HPO4·2H2O)，用容量瓶定容至1000mL。 称取21g一水柠檬酸，用容量瓶定容至1000mL。 在测试当天将上述溶液以57:43的比例混合，检测pH=5.8。通过添加上述其中一种溶液调整pH值。 0.5%果胶基质溶液 称取5g果胶（哥本哈根果胶）至烧杯中，加入20ml纯乙醇或者96%浓度的乙醇，然后使用电磁搅拌器混合均匀。缓慢加入（2分钟内）800mL的上述缓冲液，继续搅拌30分钟（不要产生泡沫）。调节PH值至5.8后，用缓冲液定容至1000mL。 以12000rpmm的速度离心10分钟。基质在-20℃凝固存储。在冷冻前应检查溶液吸收率（应该为2）。 仪器和设备 ① 分析天平 ② 电磁搅拌器 ③ 分光光度计，如UV-1601 ④ 离心机 分析步骤 待测酶液的制备 称取200-500mg样品用柠檬酸磷酸盐缓冲剂稀释，全部移入容量瓶中，定容。的变化应为每分钟0.01-0.03（理想值为0.02-0.03）。在每份样品中准备3份相同的重量。 测定 设置分光光度计相关参数，用水溶液调零。用移液器吸取3.0ml基质溶液到比色皿中并在30℃下预热15分钟。然后加入100 μ待测酶液，封口，翻转混合。在235nm波长下测定吸收率变化。 计算 在线性（至少长达5分钟）测量吸收率的增加。 △A=吸收率的差异 m=溶液中样品的数量（mg） t=时间（min） 请知悉：岛津UV-1601测量△A/t的数值。4.3 与国际组织和其他国家（地区）相关标准的比较 GB1886.174-2016关于酶制剂的要求，同时也符合联合国粮农组织/世界卫生组织下的食品添加剂联合专家委员会关于食品加工用酶制剂的要求（标准详见附件4.4 该食品添加剂在食品中的生产使用工艺 根据不同食品生产工艺和工序使用该酶制剂。果胶裂解酶用于果蔬汁、葡萄酒、果酒、果泥加工过程的工艺流程图。 4.4.1 果胶裂解酶在果蔬汁中的生产使用工艺 4.4.2 果胶裂解酶在葡萄酒酿造过程中的生产使用工艺 4.4.3 果胶裂解酶在果酒中的生产使用工艺 4.4.4 果胶裂解酶在果泥的生产使用工艺 4.5 食品中该酶制剂检验方法的情况说明 果胶裂解酶作为，在食品加工过程中发挥其功能作用。在最终产品中，果胶裂解酶制剂或因过滤、高温、蒸馏等工序被除去或失去活性，或者存在但不执行任何功能作用，这与酶制剂的情况一致，所以将无法在最终的食品测到该酶。