HPLC-ELSD法分析注射用硫普罗宁含量和有关物质.doc

HPLC-ELSD法分析注射用硫普罗宁含量及有关物质 陈来景，郭庭莉，刘鸿敏，张冬云 （河南省新谊药业股份有限公司，河南 新乡453731） [摘要] 目的：建立注射用硫普罗宁含量及有关物质高效液相色谱—蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）检测方法。方法：采用Kromasil C18（250mm ×4.6mm，5μm）色谱柱；柱温30℃；甲醇—0.5%醋酸溶液 （20：80）为流动相；流速0.8 ml·min-1；蒸发光散射检测器漂移管温度44℃，载气2.4Bar，撞击器开。结果：进样量在5.24μg～25.55μg范围内与峰面积的对数呈良好线性关系（r=0.9994），重复性试验RSD为1.08%，检测限和定量限分别为0.2μg和0.5μg。结论：方法快速、简便，结果准确可靠，重复性好 [关键词] 注射用硫普罗宁；含量；有关物质；高效液相色谱法；蒸发光散射检测器 中图分类号：R917 文献标识码：A HPLC-ELSD Analysis of Tiopronin for Injection and Its Related SubstancesChen Lai-jing，GUO Ting-li，Liu Hong-min，Zhang Dong-yun (Henan Xin-Yi Pharmaceutical Co., Ltd.,Xinxiang Henan [Abstract] Objective: To develop an HPLC-ELSD method for the determination of Tiopronin for Injection and its related substances method . Methods: The column:Kromasil C18 (250mm × 4.6mm, 5 μ m).The column temperature: 30 ℃.The mobile phase: methanol -0.5% acetic acid (20:80).Flow rate: 0.8 ml·min-1. The Drift tube temperature: 44 ℃. Gas Operation Pressure: 2.4 Bar.Impactor on . Results:The calibration curve was linear in the rang of 5.24μg ~25.55μg(r=0.9994). The repeatability(RSD) was 1.08%. The limit of detection and quantification were 0.2 μ g and 0.5μ g respectively. Conclusion: The method is simple and rapid,the results are accura [Key words] Tiopronin for Injection; Content Determination; related substances; HPLC; ELSD 硫普罗宁（Tiopronin），化学名N-(2-巯基丙酰基)-甘氨酸，首先在日本上市，而后德、意、美、瑞士等国家相继作为改善肝功能药物应用于临床。自注射用硫普罗宁由新谊药业股份有限公司在国内首家上市后，目前已有近十年的生产及临床应用历史。 注射用硫普罗宁现行标准[1]中没有建立注射用硫普罗宁有关物质检验项目，笔者经过研究，建立了注射用硫普罗宁含量及有关物质HPLC-ELSD测定方法，该方法能有效避免硫普罗宁现行标准中TLC法及文献中HPLC-UV法进行硫普罗宁质量控制的缺陷，且快速、简便，结果准确、可靠，重复性好，现报告如下： 一、材料与试剂 Agilent 1100型液相色谱仪；Alltech ELSD2000+蒸发光散射检测器；浙江大学N2010色谱工作站；Kromasil C18（250mm ×4.6mm，5μm）色谱柱。注射用硫普罗宁（河南省新谊药业股份有限公司）；硫普罗宁对照品（河南省联谊制药有限公司）；右旋糖酐40（许昌双马万通制药有限公司）；甲醇、冰醋酸为色谱纯。 二、实验方法 1色谱条件 色谱柱：Kromasil C18（250mm ×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇：0.5%醋酸溶液 （20：80）；流速：0.8 ml·min-1；柱温：30℃；进样量：10μl；蒸发光散射检测器漂移管温度44℃，载气2.4Bar，撞击器开 2样品溶液制备方法 取注射用硫普罗宁分别加入双氧水、浓氨水、冰醋酸、及纯化水，进行相应的氧化、碱水解、酸水解、80℃升温破坏试验，之后以流动相将破坏后样品溶解，