RP-HPLC法测定肌醇烟酸脂有关物质.doc

RP-HPLC法测定肌醇烟酸脂有关物质【中图分类号】R913 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2012)01－0132－01 【摘要】 目的：建立高效液相色谱法测定肌醇烟酸脂的有关物质。方法：采用色谱柱为Diamonsil―C18（4.6μm×150mm，5μ），流动相为水―甲醇―四氢呋喃（45：45：10），检测波长262nm，流速1.0mlmin-1，进样量10μl。自身对照法。结果：最大杂质峰不超过对照溶液主峰，其杂质峰面积之和不超过对照溶液主峰。结论：本方法能灵敏、准确、可靠的进行杂质检测，对肌醇烟酸脂有关物质的控制有一定的意义。? 【关键词】 高效液相色谱法；有关物质；肌醇烟酸脂。 肌醇烟酸脂是降血脂药。具有降低胆固醇及扩张末梢血管的作用。用于高胆固醇血症，动脉粥样硬化及末梢血管障碍性疾病等的辅助治疗。目前肌醇烟酸脂收载于《卫生部药品标准》化学药品及制剂第一册[1]，有关物质检查为薄层色谱法；随着部颁标准转为国家标准，杂质方法检查应该修订；本文根据试验结果，建立了高效液相色谱法测定肌醇烟酸脂的有关物质，使质量标准更加完善。? 1 仪器与试药 ? Ajient1100液相色谱仪，WVD检测器， 1100工作站。KQ―1000型超声波机(昆山市超声仪器有限公司，功率：200W)。乙晴、四氢呋喃均为色谱纯，水为二次蒸馏的纯化水；肌醇烟酸脂对照品（齐齐哈尔鼎恒升药业提供）；供试品肌醇烟酸脂片为（北京赛科药业有限公司，批号0903023：临汾宝珠制药有限公司，批号0906022：山西威奇达药业有限公司，批号0904011的市售品，规格均为0.2g。? 2 试验方法与结果[2] ? 2.1 色谱条件和系统使用性试验: 使用色谱柱为Diamonsil―C18（150mm×4.6mm，5μm），流动相[3]：流动相为水―甲醇―四氢呋喃（45：45：10）；检测波长：262nm；流速1.0mlminˉ1；柱温28℃。进样量10μl。理论塔板数按肌醇烟酸脂峰计为3800。取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加水―四氢呋喃（50：50）适量，温水浴10分钟，振摇溶解，冷却至室温，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液，量取10μl注入液相色谱仪，调节灵敏度，使主成分色谱峰的峰高达到满量程，色谱图中肌醇烟酸脂与降解产物的分离度不小于1.5? 2.2 溶液制备? 2.2.1 供试品溶液 取肌醇烟酸脂25mg，加置25ml量瓶中，加水―四氢呋喃（50：50）适量，温水浴10分钟，振摇溶解，冷却至室温，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，摇匀，作为供试品溶液。? 2.2.2 对照品溶液 取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加水―四氢呋喃（50：50）适量，温水浴10分钟，振摇溶解，冷却至室温，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，摇匀，作为储备液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，摇匀，作为对照溶液。? 2.3 方法专属性考察? 2.3.1 溶剂干扰试验 本品溶液制备以水―四氢呋喃（50:50）为溶剂，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。见图1? 2.3.2 热破坏性试验 精密量取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，水浴中加热4小时，放冷至室温，另取肌醇烟酸脂对照品适量置120℃烤箱中加热4小时后，精密量取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加水―四氢呋喃（50：50）适量，温水浴10分钟，振摇溶解，冷却至室温，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，摇匀，分别依法测定。? 2.3.3 光破坏性试验 取“2.2”相下的供试品日光下照射8小时，依法测定。? 2.3.4 氧化破坏性试验 取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加0.5%过氧化氢溶液10ml，置60℃加热4小时后煮沸2小时，放冷，加水―四氢呋喃（50：50）至刻度，依法测定。? 2.3.5 碱破坏性试验 取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加0.1molL氢氧化钠（水―四氢呋喃（50：50））溶液10ml，置60℃水浴中加热4小时，放冷后以1molL盐酸溶液调PH至中性，再加水―四氢呋喃（50：50）溶解至刻度，依法测定。? 2.3.6 酸性破坏性试验 取肌醇烟酸脂对照品25mg，置25ml量瓶中，加0.1molL盐酸（水―四氢呋喃（50：50））10ml 10ml，置60℃水浴中加热4小时，加水―四氢呋喃（50：50）10ml溶解，放冷后加0.1molL氢氧化钠调节至中性，在以水―四氢呋喃（50：50）1