三七皂苷PNS-5溶血性及生物免疫活性探究.doc

三七皂苷PNS-5溶血性及生物免疫活性探究[摘要] 目的：研究三七皂苷PNS-5的溶血性及生物免疫活性。方法：常规方法提取PNS，大孔树脂柱层析分离纯化得PNS-5。溶血试验测定红细胞溶血率，脾淋巴细胞增殖反应测定PNS-5的生物免疫活性。结果：PNS-5溶血性较小，其HD50大于8 mg/ml；PNS-5(0.1 μg/ml)显著促进了Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应。结论：PNS-5安全性好，能促进细胞和体液免疫。 [关键词] 三七皂苷PNS-5；溶血性；生物免疫活性；脾淋巴细胞增殖反应 [中图分类号] R392[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）10（b）-010-02 Study on hemolytic characteristics and immunocompetence of biology of PNS-5 QIN Feng,CHEN Yu-yong,MAO Mei-li,CHEN Ying-ying (Jiangsu Animal Husbandry Veterinary College, Taizhou 225300,China) [Abstract] Objective:To study the hemolytic characteristics and biologic immunocompetence of total saponins of panax notognseng-5(PNS-5).Methods:PNS was extracted with general method of normal butyl alcohol. PNS-5 was obtained by separating and purifying PNS with D101 macroreticular resin. The hematolysis rate and biologic immunocompetence of PNS-5 were detected with hemolysis test and experiment of splenocyte proliferation respectively.Results:The HD50 of PNS-5 was bigger than 8 mg/ml and it significantly increased concanavalin A(Con A) and lipopolysaccharide(LPS)-stimulated splenocyte proliferation in vitro in a concentration of 0.1 μg/ml. Conclusion:PNS-5 has high security and is able to increase cellular and humoral response. [Key words] Total saponins of panax notognseng-5(PNS-5);Hemolytic characteristics;Biologic immunocompetence; Splenocyte proliferation 三七总皂苷(PNS)是五加科人参属植物三七的主要有效活性成分，含有多种单体皂苷。具有扩张血管、降低心肌耗氧量等方面药理作用，近来又发现其具有抑癌作用，因此越来越受到人们的重视[1]。皂苷在高等动物的消化道中不被吸收，故口服无溶血毒性，但其注射剂应用于临床有很小的溶血性，故研究皂苷的溶血性对临床用药安全性评价有很大的作用。PNS的免疫作用已有报道[2]，但其不同极性组分的免疫作用至今未见报道，PNS-5系PNS中极性较大且得率较高的组分，本文旨在探讨PNS-5的溶血性和免疫活性，为PNS提取工艺的优化，PNS的分离纯化及临床合理用药等提供一定的参考。 1 仪器与试药 1.1 试药 三七药材（泰州医药公司）；黄芪多糖（HQ，含量大于60％，江苏省动物药品工程技术研究开发中心制备）；刀豆蛋白A (Con A)、脂多糖(LPS)、噻唑蓝(MTT)，均为美国Sigma公司产品；其他试剂均为分析纯。 1.2 动物 新西兰大白兔，普通级，体重(2.6±0.2) kg；ICR小鼠(Ⅱ级)，18～22 g；均购自扬州大学畜牧兽医学院动物实验中心。 2 方法 2.1 PNS-5的制备 按文献[3]所报道方法，精制三七总皂苷PNS。将PNS以D101大孔吸附树脂柱初步分离，得到PNS-1，PNS-2，PNS-3，PNS-4 4个流分。PNS-2再行大孔