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参芪扶正注射液对RAU大鼠外周血T细胞亚群影响
参芪扶正注射液对RAU大鼠外周血T细胞亚群影响[摘要] 目的:建立复发性口疮(RAU)大鼠动物模型,探讨参芪扶正注射液对RAU的免疫调节作用。方法:大鼠脊柱两侧注射大鼠口腔黏膜抗原乳化液,建模后将溃疡大鼠随机分为3组:对照组建模正常饮食水,参芪扶正注射液组大鼠按8 ml/(kgd)剂量灌胃,左旋咪唑组大鼠0.02 g/(kgd)剂量灌胃,均20 d。分别于建模前,成模后用药前、给药后大鼠眼眶采血行免疫组化染色,CD4+、CD8+细胞计数并进行统计学分析。结果:实验大鼠于最后一次抗原注射6 d后开始出现口腔溃疡。RAU大鼠CD4+、CD4+/CD8+细胞量较建模前降低。实验大鼠给药后,参芪扶正注射液组、左旋咪唑组外周血CD4+、CD4+/CD8+均有回升,较对照组有显著性差异(P
1.4检测项目与方法
治疗完成后,各组实验大鼠眼眶采血(取血前将试管在肝素中浸泡,自然干燥),免疫组化试剂盒染色后细胞计数:普通光学显微镜下计数100个淋巴细胞,分别计算出CD4+ T细胞、CD8+ T细胞的百分率及CD4+/CD8+细胞的比值。
1.5 统计学分析
所有实验数据用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS10.0进行统计学分析。用药前两组间比较用t检,用药后用F检验。P0.05)。参芪扶正注射液组与左旋咪唑组CD4+、CD4+/CD8+细胞数与用药前相比均有回升,有显著性差异(P0.05),而与对照组有显著性差异(P0.05;△与建模前比较,P0.05
3讨论
大量研究证实,RAU患者存在T淋巴细胞亚群的失衡,虽然不能认为T淋巴细胞亚群的失衡是RAU的发病原因,但可以肯定的是,T淋巴细胞亚群异常在复发性口疮的发生、发展中起重要的作用。
本实验造模方法与RAU的临床表现、病理、免疫指标基本相同。引起实验大鼠发生溃疡的机制可能是特异性蛋白作为抗原进入机体后,产生了特异性抗体而引发口腔黏膜的免疫反应。本实验从细胞免疫角度来观察RAU大鼠的免疫状态,实验显示大鼠CD4+ T细胞数降低,CD8+ T细胞数虽有变化,但差异无统计学意义,二者的比值降低。说明本实验的动物模型可以作为一个免疫失衡的动物模型,结合临床表现即RAU动物模型。淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群体,占外周血白细胞总数的20%~45%。T淋巴细胞在机体防御初期起到非常重要的作用。机体维持正常免疫功能状态,有赖于各种免疫细胞(特别是各类T细胞亚群)间相互协作或相互制约,以产生适度的免疫应答,使之既能清除异物抗原,又不致损伤机体自身组织。正常情况下,T细胞及其亚群的数目在周围组织中相对稳定,若T细胞总数或CD4+/CD8+ T细胞之比发生改变,即可视为免疫调节异常,此与临床某些疾病的发生发展有关[3]。大鼠的T淋巴细胞亚群失衡,从而造成大鼠对致病物敏感引发局部的或全身的免疫紊乱,导致大鼠溃疡形成。
参芪扶正注射液由黄芪、党参组成,具有补中益气、活血化瘀、消?散结和增强免疫功能的作用。近年来,参芪扶正注射液广泛应用于临床获得较好疗效[4],参芪扶正注射液对免疫系统的影响主要表现在促进白细胞的吞噬功能、恢复巨噬细胞功能、调理淋巴细胞功能以及显著增强IL-2的产生等。细胞因子IL-2可同时引起CD4+ T细胞的两个亚群Th1和Th2细胞的增殖。同时参芪扶正注射液还具有抗菌、抗病毒、消炎解热等药理作用,这对于治疗口腔溃疡的非特异性炎症有一定的帮助,与同类治疗药物相比,参芪扶正注射液的多重治疗作用具有明显的优势。本实验利用免疫方法建立复发性口疮大鼠模型后,用参芪扶正注射液对其进行治疗,同时采用临床应用疗效肯定的左旋咪唑在本实验中作阳性对照[5]。结果发现,参芪扶正注射液使降低的CD4+ T细胞数、CD4+/CD8+ T细胞比都得到回升。经比较参芪扶正注射液的免疫调节作用与左旋咪唑相当(P0.05)。因此参芪扶正注射液用于复发性口疮的治疗具有一定的开发前景。
[参考文献]
[1]陶学金,李明,逄爱慧,等.免疫方法建立复发性口腔溃疡动物模型[J].临床口腔医学杂志,2004,20(1):53-54.
[2]苗爱群,刘书翰,王兰君.复发性口腔溃疡动物模型改进[J].中华口腔医学杂志,1994,9(29):299-301.
[3]赵武述.免疫平衡研究及其临床意义[M].北京:科学出版社,2005.90-132.
[4]陆益,陆益线.参芪扶正注射液的药理作用和临床应用[J].时珍国医国药,2006,17(10):2083-2085.
[5]Crispian S,Meir G,Francina LN. The diagnosis and management of recurrent aphthous
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