双黄烧烫伤喷雾剂对大鼠烫伤治疗作用探究.doc

双黄烧烫伤喷雾剂对大鼠烫伤治疗作用探究[摘要] 目的：考察双黄烧烫伤喷雾剂的主要药效。方法：采用大鼠深Ⅱ度烫伤模型，创面应用低、中、高3个不同浓度的双黄烧烫伤喷雾剂，通过伤后不同的时间点取材，检测烧伤创面羟脯氨酸（OHP）含量、创面含水量、创面愈合率、愈合天数和组织病理变化，以烧伤喷剂为阳性对照药，观察低、中、高3个不同浓度的双黄烧烫伤喷雾剂对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响。结果：创面外用双黄烧烫伤喷雾剂中、高浓度可以降低烧伤创面水肿，增加创面OHP含量、促进肉芽组织生长，缩短愈合天数。结论：中高浓度双黄烧烫伤喷雾剂可增强胶原合成，促进上皮细胞增殖，减轻创面早期水肿，加速烧伤创面愈合。 [关键词] 双黄烧烫伤喷雾剂；大鼠；治疗作用 [中图分类号] R284 [文献标识码]B[文章编号]1673-7211（2009）01（b）-069-02 双黄烧烫伤喷雾剂是新开发的应用于烧烫伤的中药复方制剂，其主要成分为大黄、黄柏、麝香、血竭等，本实验在大鼠深Ⅱ度烫伤的创面应用该药，通过对创面皮肤的羟脯氨酸含量、创面的含水量的检测和创面愈合率、愈合天数、病理形态学的观察，研究双黄烧烫伤喷雾剂对烧烫伤创面愈合的治疗作用。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1药品双黄烧烫伤喷雾剂：由锦州医学院药物研究所研制，规格为40 ml/瓶（批号：060301；060304）；烧伤喷雾剂：由华北药业集团制剂有限公司生产，国药准字 规格为40 ml/瓶（批号：060101）。 1.1.2试剂羟脯氨酸试剂盒（南京建成生物技术研究所）。 1.1.3 仪器751紫外分光光度计：日本岛津，UV-1601；显微镜：日本奥林巴斯；台式高速冷冻离心机：美国雅培；电热恒温水浴箱：重庆实验设备厂。 1.1.4 实验动物一级SD大鼠，体重220～250 g，来源：锦州医学院实验动物中心提供。 1.2 方法 1.2.1动物模型及分组SD大鼠，体重220～250 g，10%水合氯醛腹腔麻醉（3 ml/kg），脱毛。次日，同样方法麻醉，背部置于80℃水温中烫15 s，面积约10% TBSA，制成深Ⅱ度烫伤模型，经病理证实[1]。伤后立即腹腔注射4 ml乳酸林格液。大鼠致伤后分笼饲养，自由饮食。烫伤后大鼠随机分成：①模型组(80只)：创面使用0.9%生理盐水。②阳性对照组(80只)：烧伤喷雾剂，6 ml/（kgd）。③低剂量组(80只)：6 ml/（kgd）[相当于98.1 mg/（kgd）生药]。④中剂量组(80只)：6 ml/（kgd）[相当于196.2 mg/（kgd）生药]。⑤高剂量组(80只)：6 ml/（kgd）[相当于392.4 mg/（Kgd）生药]。各组1 d给药4次，每次喷3次。各组创面用药期间如有感染，均给予抗生素治疗。 1.2.2 取材于伤后6 h、1、2、3 d取材创面组织标本测定创面皮肤的含水量，每个组每个时间相取10只大鼠，于伤后7、14、21 d观察并描绘记录创面皮肤的愈合率，于伤后1、3、5、7、14、21 d取创面组织标本测量皮肤组织的羟脯氨酸含量，创面皮肤标本放在-80℃下保存，病理标本固定于10%甲醛溶液中。每组每个时间相取10只大鼠。 1.2.3 检测指标及方法创面愈合时间和创面愈合率：每组10只大鼠，每天观察创面愈合情况，以完全上皮覆盖作为创面愈合时间的依据。每组于伤后7、14、21 d采用透明胶片描记加称重法测定局部创面面积[2]，按下列公式计算:创面愈合率=[(原始创面面积-未愈合创面面积)]/原始创面面积×100%。创面含水量测定：采用干湿比法[3]。取创面组织，去除痂皮及皮下组织，精确称重后，剪碎，80℃烤箱中烘烤72 h后称量组织干重。烧伤创面含水量=(湿重-干重)÷湿重×100%。病理组织学检查：标本常规石蜡包埋切片,行HE染色,进行光镜组织学观察。烧伤创面OHP含量检测：应用化学比色法测定OHP含量，具体操作按测试盒说明书进行。 1.2.4统计学分析实验所得数据均以均数±标准差（x±s）表示，用t检验比较组间差异。 2结果 2.1 烧伤创面组织含水量的变化 实验结果提示，双黄烧烫伤喷雾剂有明显抑制创面水肿的作用，在伤后的早期（水肿高峰阶段），起减轻水肿的作用尤为明显（P＜0.05），见表1。 表1 烧伤创面组织含水量百分比变化(%)（x±s，n=10） 与模型组相比，*P＜0.01，#P＞0.05 2.2 烧伤创面愈合率的变化（表2） 表2 伤后不同时间创面愈合率的比较(%)（x±s，n=10） 与模型组相比，*P＜0.01，#P＞0.05 2.3 烧伤创面愈合时间变化（表