反相HPLC法测定参南星口服液中人参皂苷Rg1含量.doc

反相HPLC法测定参南星口服液中人参皂苷Rg1含量【摘要】目的：建立以HPLC法测定参南星口服液中人参皂苷Rg1含量的方法。方法：采用Thermo C18（200mm×4.6mm,5μm）柱，以乙腈:0.4%磷酸=20:80为流动相，检测波长：203nm，流速1.0ml#8226;min-1。结果：人参皂苷Rg1在0.4284～2.142μg范围内线性关系良好，r=0.9999，平均加样回收率为99.2%。结论：本方法操作简便、方法可靠，结果准确、灵敏度高，重复性好，适合于参南星口服液中人参皂苷Rg1的含量测定。 【关键词】高效液相色谱法；参南星口服液；人参皂苷Rg1 Determination of GinsenosideRg1 in Shennanxing Koufuye by RP-HPLC Zengke （Loudi Institute for Drug Control417000） 【Abstract】Objective: To establish a HPLC method for the determination of GinsenosideRg1 in Shennanxing Koufuye. Method: A Thermo C18（4.6mm×200mm,5μm）column was used. The mobile phase was acetonitrile: 0.4% phosphoric acid =20:80, the detecting wavelength was at 203nm and the flow rate was 1.0ml#8226;min-1.Result:The linear range of GinsenosideRg1 was within 0.4284～2.142μg. г=0.9999,the average recovery was 99.2%.Conclusion: This method has good repeatability, flexibility and high sensitivity. It can be used for quality control of Shennanxing Koufuye. 【Key words】HPLC; Shennanxing Koufuye; GinsenosideRg1 参南星口服液是由红参、柴胡、黄芪、郁金、栀子等制成的中成药。具有健脾益气、解郁调神之功效，临床用于慢性疲劳综合症证属肝郁脾虚型、可改善倦怠乏力、思维迟钝、头晕胀痛、烦躁易怒、失眠健忘、咽喉疼痛、耳鸣目眩、食欲不振、肌肉关节酸痛等。国家食品药品监督管理局标准（试行）WS-5536（B-0536）-2002收载了该药品质量标准。原标准中含量测定项目为HPLC法测定方中君药红参的有效成分人参皂苷Rg1的含量，其色谱条件为乙腈:0.05%磷酸=99:100，结果峰形差，出峰时间晚且各色谱峰分离差，难以准确进行定量。为保证其质量稳定可靠，确保疗效，参照有关文献[4] ，笔者优化了原色谱条件改为乙腈:0.4%磷酸=20:80，结果峰形好，出峰时间适当且各色谱峰分离好，可有效、准确地对人参皂苷Rg1进行定量测定。 1仪器与试药 1.1仪器 美国Waters高效液相色谱仪（1525二元泵，717自动进样器，2487双通道检测器， 1500柱温箱，Empower色谱工作站）；AG135电子分析天平（Mettler Toledo）。 1.2试药 人参皂苷Rg1对照品（批号：110703-200726，含量97.7%,中国药品生物制品检定所），参南星口服液（批号090501、090601、090801，黑龙江天戈药业有限责任公司），甲醇为色谱纯，水为分子超纯化Ⅰ级水，其它试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1溶液的制备 2.1.1对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品（经五氧化二磷减压干燥16h，含量为97.7%）10.96mg，置于100ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得（浓度为：107.1μg/ml）。 2.1.2供试品溶液的制备 取本品5支的内容物,混匀，精密量取20ml置分液漏斗中，加氯化钠2g,振摇溶解后，加乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，再加水饱和正丁醇振摇提取5次（25ml、25ml、20ml、20ml、15ml），合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次25 ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至10 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，即得。 2.2色谱条件及干扰试验