天龙咳喘灵胶囊防治大鼠慢性低氧性肺动脉高压NO机制.doc

天龙咳喘灵胶囊防治大鼠慢性低氧性肺动脉高压NO机制[摘要]目的：探讨天龙咳喘灵胶囊（TLC）防治大鼠慢性常压低氧性肺动脉高压的NO机制。方法：SD大鼠随机分为：正常对照组、单纯低氧组和低氧+TLC组，除正常对照组外其余两组置于常压低氧舱内饲养，10 h/d，共28 d，然后测定各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）和动脉血中NO含量及NOS活性，并分析平均肺动脉压和NO含量的相关性。结果：与正常对照组相比，低氧组大鼠mPAP显著升高；TLC干预后能显著抑制低氧所致的mPAP升高，与正常对照组比较无显著性差异。慢性低氧使大鼠动脉血中NO含量和NOS活性显著降低，而低氧+TLC组与正常对照组相比，NO含量和NOS活性均无显著性差异。相关分析显示，mPAP与血浆NO含量之间呈负相关（r=0.745）。结论：TLC可通过增加NO含量，抑制大鼠慢性低氧性肺动脉高压的形成。 [关键词]天龙咳喘灵胶囊；高血压；肺动脉高压；一氧化氮；一氧化氮合酶 [中图分类号]R285 [文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2007）04（b）-016-02 缺氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary hypertension,HPH）是慢性肺源性心脏病发生发展的病理生理学基础，肺动脉压的高低与预后密切相关，因此，研究和寻找有效防治HPH的药物，已成为国内外医学界共同关注的课题。 近年来，本课题组对天龙咳喘灵胶囊治疗慢性咳喘症进行了大量临床观察，发现其治疗喘息型慢性支气管炎总有效率达70.0%，明显高于西药对照组；治疗慢性阻塞性肺病的临床控制率达64.67%，总有效率95.33%，能使最大呼气流量有明显改善[1]，在此基础上，本课题探讨天龙咳喘灵胶囊对慢性低氧性肺动脉高压大鼠的防治效果及其NO机制。 1 材料和方法 1.1 动物分组及模型建立 SD大鼠24只，体重180～200 g，雌雄不拘（广州医学院实验动物中心提供）。将大鼠随机分为正常对照组(Control)、低氧组(Hypoxia)和治疗组(Hypoxia＋TLC)，每组8只。正常对照组不作任何处理，将低氧组和治疗组大鼠置于自制常压低氧舱内，舱内氧体积分数保持在10%±0.5%，放钠石灰吸收二氧化碳，用无水氯化钙吸收水蒸气，每天低氧8 h，持续低氧4周。治疗组每天低氧前用天龙咳喘灵胶囊以0.5 g/kg剂量灌胃（由广州医学院附属第一医院制剂室提供，批号，而低氧组以等量蒸馏水灌胃。各组大鼠的常规饲养条件相同。 1.2 仪器与试剂 BL-420生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）试剂盒由南京建成生物有限公司提供。 1.3 肺动脉压力测定 用3%的戊巴比妥钠（30 mg/kg）腹腔注射将大鼠麻醉后，仰卧位固定于手术台上，做颈正中切口，将一根灌有肝素钠溶液的聚乙烯导管经右颈外静脉插至肺动脉，通过压力换能器与BL-420生物机能实验系统相连，描记肺动脉压力曲线，测定平均肺动脉压（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）。 1.4 血浆NO含量和NOS活力测定 NO的测定采用硝酸还原酶法， NO和NOS指标的测定均按试剂盒说明书进行。 1.5 统计学方法 各项数据均以x±s表示，采用SPSS10.0软件进行统计学分析，应用单因素方差分析判断其显著性，并对两变量作直线相关分析。 2 结果 2.1 平均肺动脉压的变化 低氧组大鼠呈现明显的肺动脉高压表现，其mPAP值显著高于正常对照组；低氧同时用TLC灌胃能使mPAP显著下降，与正常对照组相比无显著性差异（表1）。 2.2 血浆NO含量和NOS活力的变化 慢性低氧引起大鼠血浆中NO含量和NOS活力显著下降。TLC干预后NO含量和NOS活力明显上升，与正常对照组相比无显著性差异（表2）。 2.3 血浆NO含量与mPAP的关系 直线相关分析提示两者存在显著负相关（图1），y=31.32-0.15x,r=0.745,P＜0.01。 3 讨论 天龙咳喘灵胶囊是广东省名中医邱志楠教授的经验方，由青天葵、款冬花、法半夏、熟附子、五味子等组成。本课题组在临床研究的基础上，通过建立常压低氧动物模型，观察天龙咳喘灵胶囊对低氧性肺动脉高压的干预作用，并初步探讨其NO机制，为其更好地应用于临床提供实验依据。 实验结果显示，持续低氧4周可引起大鼠平均肺动脉压显著高于对照组，提示慢性缺氧诱导了肺动脉高压的形成。大鼠低氧同时给予TLC灌胃能使平均肺动脉压显著降低，提示TLC可防治慢性低氧性肺动脉高压。为进一步探讨天龙咳喘灵胶囊防治慢性