影响冷沉淀质量关键因素研究.doc

影响冷沉淀质量关键因素研究冷沉淀（cryoprecipitate）是新鲜冰冻血浆（FFP）在低温（约0~4℃）解冻后沉淀的白色絮状物，是FFP的部分凝血因子浓集制品，其中主要成分有：Ⅷ因子、纤维蛋白原以及血管性血友病因子，纤维结合蛋白、Ⅹ Ⅲ因子等。冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉，临床应用广泛。适用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及Ⅷ因子缺乏症患者，血管性血友病（vWD）、儿童及成年人轻型甲型血友病患者，DIC及大出血患者的替代治疗等。因冷沉淀中的Ⅷ因子为不稳定凝血因子，受多种因素影响，所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同，通过查阅相关资料及跟踪验证，对影响冷沉淀质量的关键因素分析，现报告如下： 1 冷沉淀的制备方法 冷沉淀制品是以新鲜冰冻血浆为原料，近年来因多联采血袋的广泛应用，冷沉淀的制作工艺更加简单，安全性更强，各地中心血站均能生产。目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[1]： 1.1 离心法 取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将血浆置入2～6℃水浴箱中融化。 当血浆基本融化时，取出血浆，在2±2℃的环境下重离心，使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。将上清分入空袋内，血袋底部的沉淀内大约含有20～30ml血浆，即为冷沉淀凝血因子。 1.2 虹吸法 取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后， 将新鲜冰冻血浆袋置于2～6℃水浴箱中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋形成一定的高度落差。新鲜冰冻血浆融化时，上清血浆随时被虹吸入空袋中，冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。在融化过程中控制水浴温度在2～6℃。待新鲜冰冻血浆融化至约40～50ml时，即为冷沉淀凝血因子。 以上两种方法制备好的冷沉淀需迅速放入速冻机中冷冻，于-20℃以下冰箱中保存，保存期不超过一年，输注前于37℃水浴融化，并于4小时内输注。 2 冷沉淀的质量标准 根据《全血及成分血质量要求》GB18469-2001规定，冷沉淀外观：肉眼观察30℃~37℃融化的冷沉淀凝血因子无纤维蛋白析出、无黄疸、无气泡、无重度乳糜。储血容器应无破损，应热合保留注满冷沉淀凝血因子的采血袋上的转移管至少10 cm（采血袋应符合GB14232）临床备用。容量25mL±5mL/袋，新的《中国输血技术操作规程（血站部分）（征求意见稿）》规定，冷沉淀的容量标准为25ml±5ml/袋（离心法）、45 ml±5ml/袋（虹吸法）。纤维蛋白原含量≥150mg/200mL新鲜冰冻血浆制备；≥75mg/100mL新鲜冰冻血浆制备。Ⅷ因子含量≥80IU/200mL新鲜冰冻血浆制备；≥40IU/100mL新鲜冰冻血浆制备[2]。 我站质量管理部门每月依据《中国输血技术操作规程（血站部分）》对冷沉淀质量进行抽检，抽检结果显示10%左右的冷沉淀Ⅷ因子含量达不到标准要求。 3 影响冷沉淀质量的关键因素 冷沉淀的制备经历了全血、新鲜冰冻血浆、冷沉淀三个阶段，影响因素很多，有些可控，有些不可控，任何一个环节的误差均可影响到冷沉淀制品的质量。 3.1 正常人群中FⅧ:C的含量 实际上，正常个体中FⅧ水平相差在50％～200％之间。我站对29名献血者进行FⅧ：C检测，结果FⅧ：C为95.2±25.0（%）。人体内FⅧ：C的含量与人的红细胞的ABO血型有关，O型含量最少。已知服用一些药物，如避孕药可增加FⅧ水平。血管作用肽1-脱氨-8-D精氨酸血管加压素(DDAVP)可增加循环中FⅧ水平达300％[1]。 3.2 血液采集过程 用于成分分离的全血，采血过程中应注意速度，通常200ml全血采集时间就小于3分钟，400ml全血采集时间应小于6分钟，如血液不畅，出现凝块及溶血均会影响到全血中FⅧ的含量。 冷沉淀中FⅧ：C的收获率还与采集血液的抗凝剂有关：CPD抗凝剂要高于ACD-A抗凝剂。对此差别的解释是ACD-A的pH(5.0)比CPD(5.5)更低。已知FⅧ最佳pH为7.0～7.4，在酸性中FⅧ：C变性。在血液刚采集ACD中时，抗凝剂与血液的比例较高，FⅧ接触低pH而丢失。枸橼酸盐在每种抗凝剂中的总量也影响FⅧ的回收。Rock等证实血浆中FⅧ水平与枸橼酸盐的量呈反比[1]。 3.3 制备过程 冷沉淀中的主要成分Ⅷ因子是一种不稳定的凝血因子，贮存温度及贮存时间对Ⅷ因子有很大影响，一项研究表明采血后6小时内室温保存的血液FⅧ：C明显低于(4± 2)℃保存的血液，凝血因子Ⅷ水平在 4℃保存 8 h后下降 14%;在保存 24 h后,下降约 30%;在保存 48 h后,下降约 40%。而Ⅴ因子、纤维蛋白原和其他稳定凝血因子则不受影响[3]。因此