苦胆草片HPLC含量测定方法.docVIP

苦胆草片HPLC含量测定方法[摘要] 目的：测定苦胆草片中龙胆苦苷的含量。方法：HPLC法，色谱柱为岛津Shim-Pack CLC-ODS（5 μm，150 mm×4.6 mm ID）；流动相为甲醇-水(30∶70)；流速1.0 ml/min，检测波长270 nm。结果：龙胆苦苷进样量在0.352 8～3.528 0 μg范围内线性关系良好(r=0.999 998，n=6)；加样回收率结果为99.39%，RSD为0.52%(n=6)。结论：本方法操作简便、快速、准确，可作为苦胆草片中龙胆苦苷的定量分析方法。 [关键词] 龙胆苦苷；高效液相色谱法；苦胆草片 [中图分类号]R927.2[文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2009）02（a）-043-02 Determination of Gentiopicroside in Kudancao Tablets by HPLC LU Yin-sheng (Institute for Drug Control, Jiangsu Province, Nanjing 210008, China) [Abstract] Objective: To establish a method for the determination of Gentiopicroside in Kudancao Tablets by HPLC.Methods: The SHIMADZU Shim-Pack CLC-ODS(5 μm,150 mm×4.6 mm ID)was used,mobile phase was methanol-water(30∶70) with theflow rate of 1.0 ml/min,detective wavelength was set at 270 nm. Results: The linear range of Gentiopicroside was 0.352 8-3.528 0 μg,the average recovery was 99.39% with RSD of 0.52(n=6). Conclusion: This method is simple and accurate,can be used for the quantity control of Gentiopicroside. [Key words] Gentiopicroside; HPLC; Kudancao Tablets 苦胆草片为中药龙胆制成的片剂，龙胆为龙胆科植物条叶龙胆(Gentiana manshurica Kitag.)、龙胆（Gentiana scabra Bge.）、三花龙胆（Gentiana triflora pall.）或坚龙胆(Gentiana rigescens Franch.) 的干燥根及根茎，前三种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”；春、秋二季采挖，洗净，干燥。龙胆性味苦寒，归肝、胆经，有清热燥湿、泻肝胆火的功效，用于湿热黄疸、阴肿阴痒、带下、强中、湿疹瘙痒、目赤、耳聋、胁痛、口苦、惊风抽搐的治疗。 1 仪器与试药 1.1 仪器 岛津LC-2010高效液相色谱仪系列；岛津Shim-Pack CLC-ODS（5 μm，150 mm×4.6 mm）色谱柱。 1.2 试药 苦胆草片（雷允上药业有限公司，批号分别为060501、060503、060809、070201、070204、070507）；龙胆苦苷对照品(中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号为770-200105）；甲醇为色谱纯；水为重蒸水；其他试剂为分析纯。 2 方法与结果 2.1色谱条件 2.1.1 波长的选择参照《中国药典》2005年版龙胆的含量测定，选择检测波长为270 nm。 2.1.2 流动相比例的确定参照《中国药典》2005年版一部龙胆的含量测定方法，采用药典的流动相甲醇-水（30∶70）时，主峰峰形好，且与杂质峰基线分离，故选择此流动相。 2.1.3其他条件柱温35℃；流速1.0 ml/min。 在此条件下，龙胆苦苷和样品中其他组分可达到基线分离，龙胆苦苷与其相邻色谱峰的分离度大于1.5；按龙胆苦苷峰计算，理论塔板数（N）在5 000以上；同时，取阴性供试品溶液进样，结果表明，阴性供试品在龙胆苦苷色谱峰位置处无相应峰出现，因此不会对测定造成干扰。 2.2 线性范围的考察 储备液的制备：精密称取龙胆苦苷对照品约35 mg，置于50 ml容量瓶中，用70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1 ml含龙胆苦苷0.705 6 mg）。精密量取储备液1.0、2.0