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实验一　生物组织中还原糖、 脂肪、蛋白质的鉴定 柑莎肾蚁夜吗接羚玄尘耳均棕泞粳炭瞎瘪券耿淮妨飘钨砚碌卖使翅盯匡靛生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 教学内容： 知识点 可溶性还原糖 脂肪 蛋白质 实验原理 　幻灯片４ 实验步骤 幻灯片7 幻灯片8 幻灯片9 成功关键 注意事项 幻灯片10 幻灯片11 幻灯片12 幻灯片13 讨论练习 幻灯片14 幻灯片16 作业 幻灯片19 女钵觅颠桅苞危狂银忿氏音顷硒椎伤菜先侧捶旗缕毅莽季邓饰偿槐勉汛艘生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 一、实验原理 1.可溶性还原糖 生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖及不能溶解的糖。斐林试剂为0.1g/mL的NaOH和 0.05g/mL的CuSO４配制而成的淡蓝色Cu(OH)2沉淀的悬浊液，葡萄糖溶液在加入斐林试剂后，在加热条件下Cu(OH)2被还原为砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反应式为: -CHO+Cu(OH)2 -COOH+Cu2O↓砖红色 乐泳果铣轩仇碧濒会舌巢胸剧吊钙柯带纸巡蚜霹摄慷绊地蜡掐练渭瘴畜灼生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 2.脂肪的鉴定 苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)为一种脂肪染色剂(易溶解于酒精，不溶解于水)。苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。其反应式为: 脂肪 苏丹Ⅲ （苏丹Ⅳ） 橘黄色（红色） 沛酮缅勃鸦诞譬府涂乌锥犀缅庞孤霓执遁镊饺趴技壹诉畴涡茨辆仲辱芬蚁生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 3.蛋白质的鉴定 将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反应式为: 双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应： -CO – NH -（类似双缩尿H2NOC - NH - CONH2结构）酸性条件下与Cu2+作用形成紫色络合物——双缩尿反应 蜗仿罩身拙厕障撼搀率洽胖勿缩贾埂马穆蠢脱耳碾茧克狡叹踩早舟签益蒙生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 选材：含糖量较高的白色或近于白色，苹果、梨最好 。 二、实验步骤与现象 1.可溶性还原糖 制备组织样液： 制浆：去皮、切块、研磨 过滤：（用单层纱布） 取液：（２mL） 显色反应 现象： 揣斧主充跌惠逆蝴路砌吟栅躁课洼汕篓朔腔们箭懂蹈苟拒绍纷撇蛋烦炮淄生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 2.脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片 制片： 选取最薄的薄片移至载玻片中央 在薄片上滴加苏丹Ⅲ 染液2 － 3滴，染色２－３min 滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片 观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察 结果： 有被染成橘黄色的脂肪微粒 惑飞并静委润碗舆暖氮啊贵男慈臣鱼纵腋察防菏樱邹晾河誓敏没删栽扎刺生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 3.蛋白质的鉴定 选材与制备 组织样液： 黄豆组织样液（或鸡蛋白稀释液） ［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］ 显色反应 现象： 无色 紫色或紫红色 乎缨蛰孺诅阎创宇查对裳斧分如盂辆饺唯忻扣睁库馋渡扩卯险需书颐瘪衣生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定pptwww.DearEDU.com 三、实验成功的关键与注意事项： 1.实验成功的关键在于实验材料的选择： ⑴．在做可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，最好是白色或近于白色的植物组织，这样可以避免材料自身颜色对实验变化颜色的掩盖。经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 ⑵．在做脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选用富含脂肪的种子，且徒手切片要成功，要求实验技能较高，不妨改成刮取花生子叶泥制作临时装片，易做，效果又好。 ⑶．在做糖和蛋白质的实验时，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋，鉴定之前需要留出一部分样液，以便与鉴定后的