第二章 培养基和配制.ppt

培养基; 培养基的成分 第一节;1 无 机 盐 ;1）大量元素 N是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在植物生命活动中占有重要的位置。 P是磷脂的主要成分。培养基中常用KH2PO4 NaH2PO4等。 K对碳水化合物合成，转移，以及氮素代谢等有密切关系。;Mg、S、Ca是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂，对核蛋白体结构具有稳定作用； S是含S氨基酸的蛋白质的组成成分。 Ca是构成细胞壁的成分，对细胞分裂，稳定质膜结构有显著作用，此外，Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。;2）微量元素 在微量元素中，铁的使用最大，铁是一些氧化酶的组成成分。同时又是叶绿素形成的必要条件。 由于培养基的pH较高，所以培养中几乎都使用不易分解的乙二胺四乙酸铁这种鳌合物来防止铁的沉淀。; 硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系； 铜是某些氧化酶的成分，能够促进离体根的生长； 锰参与植物的光合、呼吸代谢； 钼参与氮素的代谢； 氯是光合作用水光解的活化剂。 微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢的调节。;No MS salts 没有任何生长特征 ;** 愈伤组织缺无机营养表现症状 N----某些愈伤组织出现花青甙，没有导管形成 N、P或K----细胞过度增大且形成层减少 S----愈伤组织非常明显褪绿 Fe----细胞分裂停止 B----细胞分裂和细胞伸长迟缓 Mg和Mn----影响细胞伸长; 培养基的成分 第一节; 2 有 机 物;种类： 硫胺素---维生素B1 VB1 吡哆素---维生素B6 VB6 烟 酸---维生素B3 Vpp 抗坏血酸---维生素C Vc 以及B5、生物素、叶酸。 浓度：0.1－1.0mg/L　 作用： VB1　　促愈伤组织产生，提高活力 VB6 　 促根生长　 Vpp　　与代谢和胚发育有关 Vc　　 防组织褐变;2.2 肌　醇; 2 有 机 物;椰乳： 促愈伤组织和细胞培养，用量10～20%。使用注意茎尖大小。 ; 水解酪(乳)蛋白： 浓度100-200mg/L，多用于微茎尖培养。;2.4 氨基酸 种类：甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、丝氨酸、丙氨酸、半胱氨酸以及酰胺类物质（如天门冬酰胺）和多种氨基酸的混合物（如水解酪蛋白、水解乳蛋白）等。 注意：氨基酸类物质只有在含有无机氮的情况下，对离体组织生长才有较好的效果。; 培养基的成分 第一节;3 碳源和能源　;蔗糖 （0%） ; 培养基的成分 第一节;4 植物激素;4.2 细胞分裂素（CTK） （1）种类：Kt---激动素 BAP---苄氨基嘌呤 2－iP---异戊烯腺嘌呤 ZT-玉米素 TDZ （2）作用：启动脱分化、细胞增殖，诱导愈伤组织芽分化、芽增殖，丛生芽。 （3）浓度：0.05－10.0mg/L （4）配制：溶于稀酸或稀碱 ; 激素配比模式 生长素与细胞分裂素：它们的比例决定着发育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。 高：有利于根的形成和愈伤组织的形成； 适中：有利于根芽的分化； 低：有利于芽的形成;细胞分裂素与生长素对器官或愈伤组织的影响;No BAP;4.3 赤霉素（GAs）　 （1）种类：GA3 （2）作用：促茎伸长，促胚发育成植株；打破休眠；一般在器官形成后加入。 注意：不耐热；生理活性5－15d，时间太长有抑制作用。 较生长素和细胞分裂素少用，可溶于水。 ; 培养基的成分 第一节;5 琼脂/培养体支持材料;6辅助性物质;　6.1 活性炭;6.2 抗生素;6.3 抗氧化物;6.4 其它成分： AgNO3 ： 作用：吸附乙烯，促进茎芽分化，防玻璃化苗、早衰、落叶；只能短期培养， 用量 1~10mg/L，需过滤灭菌;pH值;种类;培养基;第二节 培养基的制备 ;1 水和药品;;2.1 母液（贮备液，stock so