乳酸菌定义分类、分离筛选及应用.pptVIP

乳酸菌概述 高洁 * 酱油、腐乳 馒头、酒 醋 酸奶、奶酪 乳酸 菌 醋酸 菌 酵母 菌 霉菌 发 酵 乳 酸 菌 概 述 发展史 定义 分类学地位 分离鉴定 应用领域 圣经《创世纪篇》 亚伯拉罕以甜奶及酸奶 款待三位天使 希腊史诗“独眼巨人” 以器皿盛满乳清、 架上堆满干酪 贾思勰的《齐民要术》 记载酸奶的制法、 成吉思汗令士兵 携带酸奶，保证健康 1930年，代田博士分离到乳酸杆菌， 命名为代田株——养乐多 1919年，克拉索创建酸奶生产工厂 给商品命名为“达能” 1905年，戈里戈罗夫 从酸奶中分离到“保加利亚乳杆菌” 1878年，李斯特 从酸败的牛奶中分离出乳酸乳球菌 1857年，巴斯德 用显微镜观察到了乳酸菌 1、发展史 乳酸菌是一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡是能发酵葡萄糖或乳糖产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。这是一群相当庞杂的细菌，目前至少可分为18个属，共有200多种。 2、定义 3、分类地位 门 纲 目 科 属 种 “两界学说”： 植物界、动物界 “六界学说”： 植物界、 动物界、 原生生物界、原核生物界、 真菌界、 非胞生物界（病毒） 厚壁菌门 芽孢杆菌纲 乳杆菌目 .tw/home.php 乳杆菌科、 肠球菌科、 链球菌科 …… 采样 富集培养 分离纯化 采样用具：灭菌 采样地点：根据乳酸菌 生理习性选取 乳汁、消化道、发酵食品 4、分离鉴定 选择适合目的菌生长的 培养基及培养条件 37℃培养48h，厌氧培养 梯度稀释（ 10-5 / 10-6 / 10-7 ） 平板涂布法/平板划线分离法 挑取单菌，镜检（形态，G+，H2O2-） 试管穿刺4℃保存 / 分子学 方法 传统 方法 待鉴定目的菌经过生理生化实验后， 与阳性对照菌株比较， 查阅伯杰氏系统学鉴定手册。 提取目的菌的基因组DNA， 选择通用引物对16S rDNA进行PCR扩增 扩增后的片段进行测序， 测序结果与数据库比对 —— 初步鉴定结果 不同碳源发酵实验 45 ℃ 生长实验 10 ℃ 生长实验 8% NaCl 生长实验 6% NaCl 生长实验 吲哚实验 是否凝乳 是否产气 硝酸盐还原实验 硫化氢实验 淀粉水解实验 明胶液化实验 触酶实验 革兰氏染色反应 细胞形态 菌落表面形态 菌落颜色 目的菌 （待鉴定菌种） 阳性对照 （已知菌种） 阴性对照 （空白） 实验项目 T G C A C A G A G T C T A C G T *